高考生物+选修一生物技术实践测试题(含答案)

高考生物 选修一生物技术实践

一．解答题（共40小题）

1．如图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图，请分析并回答：

（1）在鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约 的空间．经过10～12天后，在酸性条件下用重铬酸钾检测样液，如果颜色变为 色，说明产生了酒精．

（2）过程乙中使用的微生物是 ，可以从食醋中分离纯化获得，步骤如下： 第一步：配制 （固体/液体）培养基． 第二步：对培养基进行高压蒸汽灭菌．

第三步：接种．微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和 ． 第四步：培养．温度控制在 ℃范围内． 第五步：挑选符合要求的菌落．

（3）在 的条件下，如果缺少糖源，乙中的微生物将甲过程的产物变为 ，再将其变为醋酸．

2．近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品．请分析回答下列问题：

（1）在果醋制作时，运用醋酸菌在供应 和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，请写出该过程的化学反应式： ．

（2）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制．用盐腌制时，应注意控制 ；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在 %左右．

（3）制作泡菜的原理是 ．蔬菜在腌制过程中，会产生亚盐，在 条件下，亚盐与对氨基苯磺酸发生 反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成 色染料． 3．根据下面的实验装置图（图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）回答问题：

（1）图甲所示装置可用于提取 （填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”）．

（2）制作果酒时可选用图乙的装置．为适当提高果酒的生产速率，进气口应 ；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是 ．

（3）图丙为樱桃果酒生产工艺流程简图，其中冲洗的目的是 ．樱桃榨汁前需要除去果柄，此操作是在冲洗之 进行的．为了提高樱桃的出汁率，在压榨前可加入一定量的 酶．

（4）若是从混杂的微生物中分离酵母菌应使用 培养基．从微生物培养的角度分析，樱桃果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐和 ．

（5）樱桃果酒制作是否成功，发酵后可在酸性条件下用 溶液来鉴定．在酒精发酵旺盛时，醋酸菌 （能、不能）将果汁中的糖发酵成醋酸，乳酸菌 （能、不能）将乳酸分解CO2和水．

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4．【生物﹣﹣选修I：生物技术实践】 回答下列关于腐乳制作的问题：

（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品．多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是 ，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为 和 ；其产生的 能将豆腐中的脂肪水解为 和 ．

（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制 生长．

（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤．卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的 ．

（4）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物 （5）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或香味）． 5．阅读如下材料，回答下列问题：

资料Ⅰ：相传，清康熙八年，安徽举子王致和，京考未中，在京城做起了卖豆腐的生意．一天，他发现没卖完的豆腐长了白毛，舍不得丢弃，就将豆腐装入坛内撒盐腌了，再密封起来，秋末开坛意外制成了“闻着臭，吃着香”的腐乳．

资料Ⅱ：19世纪中期，法国的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击．在生产过程中出现了葡萄酒变酸、变味的怪事．经研究，法国科学家巴斯德发现，导致生产失败的根源是发酵物中混入了杂菌．

（1）中国的传统发酵技术源远流长，是人类对微生物的利用，其中制作腐乳的微生物主要是 ，制作果酒的微生物是酵母菌，它是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，其反应式为 ．

（2）在腐乳制作过程中，微生物生长的温度控制在 ；加盐腌制，盐可以析出豆腐中的水分，同时，盐能 ．

（3）从资料Ⅱ中看出， 是研究和应用微生物的前提．在无菌技术中，对操作者用酒精擦拭双手属于 ，对金属用具、玻璃器皿、培养基等要进行灭菌，其中，培养基只能用 灭菌．

（4）通常在一环境中微生物有多种混合在一起，若要对某种微生物进行纯化，最常用的方法是 ．

6．乳酸茵是存在于人体内的益生菌，能助消化，利于肠道健康，因此常用于酸奶的制作．回答下列问题：

（1）与腐乳制作所用微生物相比，乳酸菌在结构上的主要特点是 ． （2）大量生产乳酸菌一般用 ．（填“固体”或“液体”）培养基，培养基中除添加必需的营养成分外，还需要注意控制 等培养条件．

（3）酸奶制作时杀菌很重要，牛奶一般用 法，所用仪器如接种环常用 法，接种室用 法．

（4）含有抗生素的牛奶 （填“适合”或“不适合”）作为酸奶的制作原料．

（5）乳酸菌也常用于泡菜的制作，腌制泡菜过程中亚盐含量的变化是 ． 7．人们的日常生活与传统发酵技术密切相关．请回答下列相关问题： （1）腐乳制作中主要利用了微生物产生的 酶和脂肪酶．

（2）在制作果醋、腐乳、泡菜的过程中需要提供充足氧气的是 ．在发酵产物制作过程中都需要培养微生物，为防止杂菌污染，需要对培养液（基）和培养器皿进行 （填“消毒”或“灭菌”）．

（3）利用酵母菌酿酒时，一开始持续通入空气，导致酵母菌数量 （填“增多”、“不变”或“减少”），然后再密封，使酒精 （填“增产”、“减产”或“不产生”）．

（4）果酒发酵后是否有酒精产生，可以用 来检验，在酸性条件下呈现灰绿色．

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（5）纯化果酒制作的菌种时，利用 （固体、液体）培养基．接种时常用的方法有平板划线法和 法．

8．近年来．纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利于不同微生物的发酵作用制作的美味食品．请回答： （1）腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种到豆腐上，这样可以 ．腐乳制作的过程中，加盐的作用是 和 ．从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于 ． （2）在果醋制作时，醋酸菌在 供应和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用 生成醋酸． （3）制作泡菜的原理是 ．

（4）胡萝卜素是重要的药物和食品添加剂，在胡萝卜素的萃取中，所用的有机萃取溶剂应该具有较高的 ，以便胡萝卜素能充分溶解其中．对萃取的胡萝卜素样品和标准样品进行点样层析时，如果出现 现象，则说明胡萝卜素提取成功． 9．2016年初，电视台“手艺”栏目播放了《臭味相投》，介绍了腐乳的手工制作和王致和厂工业化生产流程，传播了腐乳制作展示的同时，发扬了中华传统文化．分析下列有关腐乳制作的问题：

（1）腐乳制作过程用到的主要微生物是 ，该微生物生长的最适温度为 ．

（2）加盐腌制过程中，离瓶口越近的，加盐量越 ，原因 ．和腐乳风味关系最密切的配料是 ，其中加酒的目的是 和 ．

（3）乳腐外部致密的一层皮是 ，而果酒变酸后表面一层菌膜是 ．

10．腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵的大豆食品，如臭豆腐、酱豆腐等，该食品味道鲜美，易于消化吸收，而腐乳本身又便于保存，所以深受人们的喜欢．如图是腐乳制作的流程示意图，根据流程回答问题．

（1）流程图中未写出的程序是 ．

（2）含水量为 左右的豆腐适合用来做腐乳．制作过程中，加盐的作用是 ．

（3）制作腐乳的原理是：毛霉等微生物产生的 能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸； 可将脂肪分解为甘油和脂肪酸．

（4）传统制作腐乳，豆腐块上的毛霉来自 ，现代腐乳生产是在严格 的条件下，将优良的毛霉菌种直接接种在豆腐上．

（5）影响腐乳的风味和质量的因素是 ． （至少列举两项） 11．某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用 对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是 ．

（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有 和 ．分离纯化时应挑选出 的菌落作为候选菌．

（3）乳酸菌在﹣20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的 （填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）．

12．泡菜是我国的传统食品之一，但制作过程中产生的亚盐对人体健康有潜在危害．根据实验研究，得到相关数据如图．

（1）与酵母菌相比，乳酸菌最主要的结构特点是 ．

（2）制作泡菜的原理是 ；制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是 ．

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（3）据图分析，第8天后的泡菜更适于食用，理由是 ．可用 法检测泡菜中亚盐的含量，因为亚盐能与某些化学物质发生反应后形成 色染料．

（4）若要测定泡菜中乳酸菌的数量，可在显微镜下用 直接计数；泡菜制作过程中pH值呈下降趋势，原因是 ．

13．某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚盐含量变化”开展了研究，操作如下：某年1月4日下午选取1、2、3号三只相同的泡菜坛，在每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜0.6kg，再分别倒入相同量的煮沸并冷却的10%的盐水，将坛密封，置于同一环境中．封坛前进行第一次取样测定亚盐含量，后来定时测定，结果如图．请问：

（1）实验中盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是： 在腌制过程中，会出现坛中溶液量增加，这是由 ．

（2）在腌制泡菜的过程中，起主要作用的微生物是 ，用水封坛的作用是 ； （3）该小组对实验数据的处理方法是否合理？ ．说明理由： ．

（4）测定亚盐含量的方法是 ，其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成 色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚盐的含量． （5）实验中三只坛中产生的亚盐含量存在差异，最可能的原因是： ．

14．农村中泡菜的制作方法是：新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”．密封后置于阴凉处，适宜环境温度为28～30℃．有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”，据此分析，回答下列问题．

（1）用白酒擦拭泡菜坛的目的是 ．

（2）若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是 ．

（3）制作过程中，需要加入盐水，其中清水与盐的比例应为 ，加入“陈泡菜水”的作用是 ．

（4）若要获得优良乳酸菌菌种，应选用培养基培养．培养基中应含有 、 、水和无机盐，同时需要在培养基中添加 ．纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有 ．培养时还需提供 条件．

15．泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快、亚盐降解能力强的乳酸菌，科研人员做了如下实验．请回答问题：

（1）在无菌操作下，使用无菌水对泡菜汁进行 ，将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了

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CaCO3的乳酸细菌培养基（MRS培养基）平板上．在适宜条件下培养后，挑取有 的菌落，继续在MRS平板上用 法分离，得到单菌落．

（2）取分离到的乳酸菌接入MRS液体培养基中，间隔取样测定pH，目的是筛选出 的乳酸菌． （3）取上一步筛选出的乳酸菌接入含有NaNO2的MRS培养基中，培养一段时间后，用 法测定NaNO2的含量，测定前需要配备 ，此过程的目的是筛选出 的菌株． （4）乳酸菌细胞结构的最主要特点是 ，其代谢类型为 ． 16．回答下列有关泡菜制作的习题：

（1）制作泡菜时，所用盐水煮沸，其目的是 ．为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 ．

（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程．

（3）泡菜制作过程中影响亚盐含量的因素有 、食盐用量和 等．

（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ．

17．根据如图的实验装置图（如图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）回答问题：

（1）图甲所示装置可用于提取 （填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”）．

（2）制作果酒时可选用图乙的装置．为适当提高果酒的生产速率，进气口应 ；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是 ．

（3）图丙为樱桃果酒生产工艺流程简图，其中冲洗的目的是 ．樱桃榨汁前需要除去果柄，此操作是在冲洗之 （填“前”或“后”）进行的．为了提高樱桃的出汁率，在压榨前可加入一定量的 酶．

（4）若是从混杂的微生物中分离酵母菌应使用 培养基．从微生物培养的角度分析，樱桃果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐和 ．

（5）樱桃果酒制作是否成功，发酵后可在酸性条件下用 溶液来鉴定．在酒精发酵旺盛时，醋酸菌 （填“能”或“不能）将果汁中的糖发酵成醋酸． 18．下面是与植物芳香油的提取相关的问题，请回答．

（1）玫瑰精油的提取可使用图1所示装置，这种方法叫 法；蒸馏时收集的蒸馏液 （是/不是）纯的玫瑰精油．

（2）橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用 法提取橘皮精油．

（3）胡萝卜素是 色的结晶．从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是 法，加热时应该注

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意控制 ，一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成 比． （4）将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，图2为鉴定结果示意图，请据图回答．A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是 ．

19．如图为提取玫瑰精油的蒸馏装置图，请回答下列有关问题：

（1）用于提取玫瑰精油的玫瑰花要在花开的 （填时期）采收，且玫瑰花瓣与清水的质量比一般为 ．

（2）玫瑰精油具有 的性质，所以可采用该装置提取．该装置中收集到的产物为 ，装置中水和原料量一定时，则蒸馏过程中影响玫瑰精油提取量的主要因素有 ．

（3）该装置中冷凝管的冷却水从 （填“上”或“下”）口进入，蒸馏后获得的白色乳液加入NaCl后用 （填装置）进行处理，分离的油层中，有一定的水分，此时可加入 进行吸水．

20．根据下面装置图，回答有关问题：

（1）装置甲表示的是植物芳香油提取中的 法，常用于玫瑰精油的提取；该装置还可用于胡萝卜素提取中的 过程，在进行该过程前，要过滤，其目的是 ．

（2）装置乙常用于果酒、果醋的制作，在果酒制作时起作用的微生物是 ，它与果醋制作的微生物相比，不同的结构特点是 ．如果该装置用于制作酸奶，对该装置如何处理？ ．

（3）装置丙表示的方法为 ，在加热的瓶口安装了回流冷凝装置，其作用是 ．要想取得好的效果，必须保证原料颗粒小，温度高，时间长，目的是让提取的物质 ． 21．如图所示为某同学绘制的玫瑰精油的提取装置．请回答下列问题：

（1）分离装置中常加入氯化钠，目的是 ．制取纯玫瑰精油时，加入无水硫酸钠的目的

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是 ． （2）植物芳香油的提取方法有 、 、 ，由于玫瑰精油具有化学性质稳定、 （难或易）溶于水等特性，而适宜用图示方法提取．

（3）提取过程中，许多因素都会影响玫瑰精油的品质，例如 ，会导致产品的品质比较差，而如果提高品质，就需要延长 ．

22．根据植物芳香油提取的相关知识，回答下列问题： （1）玫瑰精油的提取可使用如图所示装置，这种方法叫 法；蒸馏时收集的蒸馏液 （填“是”或“不是”）纯的玫瑰精油，原因是 ．进水口是图中的 （填图中的编号）． （2）柠檬芳香油的提取常用 法．

（3）用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是 ．分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是 ，除去固体硫酸钠的常用方法是 ．

23．[生物﹣﹣选修1生物技术实践]

从胡萝卜中提取的橘黄色物质，包括多种结构类似物，统称为胡萝卜素．胡萝卜素通常是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂． 图1为提取胡萝卜素的装置示意图．图2为胡萝卜素粗品鉴定装置示意图，请据图回答下列问题：

（1）除了可以从植物中提取天然胡萝卜素外，还可以从养殖的岩藻中获得或者利用 生产．

（2）胡萝卜素的萃取实验流程为：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→ →浓缩→胡萝卜素．萃取过程中采用水浴加热的原因是： ．

（3）在加热瓶口安装冷凝回流装置的目的是 ．

（4）在乙醇、丙酮、石油醚、乙醚这四种有机溶剂中，最适宜用作提取胡萝卜素的萃取剂是 ．萃取的效率主要取决于萃取剂的 ．

（5）胡萝卜素粗品鉴定的方法名称是 ．如果层析液没及e会导致 ，而使鉴定失败． 24．如图为提取胡萝卜素的装置示意图，请回答有关问题：

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（1）胡萝卜素萃取的效率主要取决于 和 ，同时还受到 、 、 和 等条件的影响．

（2）一般来说，要想萃取效果好，要保证 ．

（3）萃取过程应该避免明火加热，采用 加热，其原因是 ． （4）在加热瓶口安装冷凝回流装置的目的是 ． 25．请回答下列与植物有效成分的提取相关的问题：

（1）玫瑰精油提取，当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是 ． （2）提取玫瑰精油的过程中进行冷却的原因是 ．

（3）橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用 法提取橘皮精油，其中将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡的目的是 ．

（4）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是 法；一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成 比．

（5）将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，右图为鉴定结果示意图，则甲、乙中属于胡萝卜素层析带的是 ．

26．空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降．某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况．实验步骤如下： ①配置培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）； ②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数． 回答下列问题：

（1）该培养基中微生物所需的氮来源于 ．若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是 ．

（2）步骤③中，实验组的操作是 ．

（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了 现象．若将30（即36﹣6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法 （填“正确”或“不正确”）．

27．多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用，是土壤、河水中常见的污染物之一．如图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要

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步骤．请回答：

（1）步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能 ．

（2）步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中，在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是 ．采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是 （3）接种环通过灼烧来灭菌，完成步骤④中划线操作，共需灼烧接种环 次

（4）为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株，研究人员又对菌种Q进行了诱变处理，得到突变株K．为了进一步鉴定菌株K并比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力，设计了下列实验，请补全实验步骤：

①取9只锥形瓶均分成三组，编号A、B、C

②向A、B、C三组锥形瓶中加入 的培养液． ③向A、B、C三组培养液中分别加入 ． ④28℃恒温培养3天后，测定 ． 28．【生物﹣﹣选修1生物技术实践专题】

从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．

（1）接种前要对培养基进行 处理．在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在 条件下进行．

（2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．如培养纤维素分解菌的菌样应从 环境中采集．

（3）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制 培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的 ．

（4）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是 ，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生 来筛选纤维素分解菌．某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是 ．

29．据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众普遍关注．葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环．请回答下列问题．

（1）某兴趣小组欲检测某果汁类食品中含有葡萄球菌，请帮他们完善下列步骤．

①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨．NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节PH，分装到锥形瓶后进行 ，在无菌状态下加入卵黄液（100mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀后立即倒平板．

②接种：取待检测果汁2.5ml加入22.5mL灭菌生理盐水中，制成接种样液． 实验组：将接种样液用 法接种在含卵黄的固体培养基上．

对照组：将 用划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为 对照．

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将上述接种后的培养皿同时放在36℃的恒温箱中培养48h． ③观察：观察培养基表面 ．

（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供 ． 葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来，此培养基属于 培养基．

（3）若要统计某土壤样品中该活菌数目，宜采用 法．

30．在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行 处理．

（2）要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中的培养基应具有的特点是：在 的培养基中加入 ．

（3）在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ．

（4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是 ，有透明带菌落利用的氮源主要是 ，据此可筛选出目的菌．

（5）若实验接种时用的是稀释涂布平板法，在统计菌落数目时得到4个平板，统计的数目分别为21、213、257、278，则对数据处理后取平均值计数为 ，该方法往往比活菌的实际数目偏 （高/低）．

31．I．培养基的配制与培养是微生物实验中的一个重要环节． （1）图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步

骤之一，一般称为 ．配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行 ，培养基在接种前要进行 灭菌，灭菌是否彻底或是否被污染需要检测，方法是 ．

Ⅱ．从自然菌样中筛选理想菌种的步骤是：采集菌样 富集培养 纯种分离．

（2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．培养嗜盐菌的菌样应从 环境采集．

（3）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择 的培养基，并在 条件下培养．

（4）图2和图3是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，获得图2效果的接种方法是 ，获得图3效果的接种方法是 ．

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32．为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制了如表培养基配方： K2HPO4 pH 蛋白胨 乳糖 蔗糖 伊红 美蓝 蒸馏水 10g 5g 5g 2g 0.4g 0.065g 100mL 7.2 （1）该培养基所含的碳源有 ，其功能是 ． （2）该培养基所含的氮源有 ，其功能是 ．

（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是 ． （4）该细菌的同化作用类型是 ． （5）该培养基可用来鉴别哪种细菌？

A．霉菌 B．大肠杆菌 C．酵母菌 D．乳酸菌．

33．2011年，荷兰皇家航空公司宣布，从9月份起，启用以生物柴油（即俗称的“地沟油”）为燃料的客机执飞阿姆斯特丹至巴黎的航班，以减少碳排放．科学家发现，在微生物M（单细胞）产生的脂肪酶作用下，可以将地沟油提取的植物油与甲醇反应能够合成生物柴油．

（1）用培养基培养微生物时，培养基中应有 、 、 和 等营养，同时还必须满足微生物生长对 、 、 的要求．在筛选产脂肪酶的微生物M时，应用 培养基，可以在培养基中添加 作为唯一碳源． （2）培养基灭菌采用的最适方法是 法．

（3）图示是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图，过程一的接种方法是 ，过程二的接种方法是 ，此方法计数的微生物M的数目 （＞、=、＜）实际活菌数，接种后应注意培皿基要 放置．

34．每生物兴趣小组为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如下表所示，实验步骤表格所示．请分析回答问题： KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4•7H2O 0.2g 1g 葡萄糖 10g 尿素 15g 琼脂 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000mL （1）简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 指示剂，细菌合成的 将尿素分解为 ，pH升高，使指示剂变为红色． （2）培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌，这种培养基属于 培养基．

（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的 和 ，实验中需要振荡培养，原因是 ．

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（4）图1是利用 法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．通常还可以 方法分离到一个细胞繁殖形成的菌落

（5）关于图1的操作方法和结果，叙述正确的是 ． A．操作时要将接种环放在火焰上灼烧灭菌 B．划线操作须在火焰旁进行

C．多次划线后培养才可以分离到一个细胞繁殖形成的菌落 D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

35．尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如表所示，实验步骤如图所示，请分析回答问题： KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4•7H2O 0.2g 10g 葡萄糖 1g 尿素 15g 琼脂 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL （1）此培养基能否用于植物组织培养？为什么？ ． （2）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图．则获得图A效果的接种方法是 ，图B效果的接种方法是 ，一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是 （答出一条即可）．

（3）“目的菌”生长所需的氮源来自培养基中的 ，其同化作用类型是 ．

（4）培养基中加入尿素的目的是筛选到 ，这种培养基从功能上属于 培养基． 36．[生物﹣﹣选修l生物技术实践]

下列是对土壤微生物开展探究活动的三个案例，请在相应的空白处作答． （1）案例l：探究落叶在土壤微生物的作用下是否发生腐烂（分解）． 设计思路： 组对照组 实验组 别 处不做处理的带落叶的土壤 处理过的带落叶的土壤 理 将等量的带落叶的土壤，用带有编号的相同的塑料袋分别包扎好，并埋在5cm深的土情壤中 况 对实验组土壤应该进行 处理，尽可能排除 的作用． 第12页（共30页）

（2）案例Ⅱ：探究土壤微生物对淀粉的分解作用． 实验步骤：

①将取自农田的土壤制成土壤浸出液，放在烧杯中静置一段时间．

②另取两只烧杯，编号为A、B，放入等量的淀粉糊．在A烧杯中加入30mL土壤浸出液，B烧杯中加入 ．

③在室温条件下放置7天后，从A烧杯中取20mL溶液，分别加入A1和A2两支试管各10mL；从B烧杯中取20mL溶液，分别加入B1和B2两支试管各10mL．

④在A1和B1中加入碘液；在A2和B2中加入 ，并进行 处理． ⑤观察各试管的 ，记录实验结果．

（3）案例Ⅲ：探究土壤微生物中是否含有分解纤维素的细菌的实验过程中，应将土壤浸出液接种在以 为惟一碳源的培养基上，并用 （试剂）加以鉴别．

37．某些农作物秸秆富含纤维素，纤维素经过水解可以形成葡萄糖，葡萄糖再经过发酵可以生产酒精．如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程，请回答下列问题：

（1）农作物秸秆含有丰富的纤维素，纤维素要经过纤维素分解菌分解成葡萄糖．人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌．分离纤维素分解菌常用的方法是 ．其实验流程是；土壤取样→选择培养→ →将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生 的菌落．

（2）纤维素分解菌能合成纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即 ．前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将它分解成葡萄糖．

（3）图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌，在酒精发酵时一般将温度控制在 ℃．发酵后是否有酒精产生，可以用 来检验．

（4）利用葡萄能生产果酒，进而生产果醋，生产果醋常用的菌种是醋酸杆菌，醋酸杆菌与酵母菌在代谢类型上的区别是 ．

38．有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等．研究人员用化合物A、盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物．分析回答问题：

（1）培养基中加入的化合物A是 ，为微生物的生长提供 ，这种培养基属于 培养基．

（2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入 ． （3）在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度．若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是 ，操作时采用 灭菌的方法；还可用 方法操作．

（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是 ． 39．食物中的纤维素（即膳食纤维）对人体的健康有着重要的作用，其主要存在于蔬菜和粗加工的谷类中，有促进肠道蠕动、利于粪便排出等功能．但纤维素不能被人体吸收，因为人体缺乏分解纤维素的酶．某校生物兴趣小组开展了以下探究纤维素酶研究的工作，请回答下列问题：

（1）纤维素酶是一种 酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖昔酶三种，其中能够将纤维二糖分解为葡萄糖的是 ．

（2）自然界中不少微生物都具有分解纤维素的能力．要从土壤中筛选含有纤维素酶的微生物即纤维素分解菌，应在含有纤维素丰富的 土中采样．取回的土样中含有多种微生物，兴趣小组可在培养基中加入 来帮助筛选纤维素分解菌，目标菌落的特征是 ．为了提

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高酶的产量，研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多纤维素酶的菌株，把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养，观察两组菌株菌落周围的情况，选出 （填“透明圈大的”“透明圈小的”或“无透明固的”）菌株即为所需菌株． （3）马、牛、羊等食草动物也具有消化纤维素的能力．若从马的胃中分离出纤维素分解菌，与从土壤中分离出的纤维素分解菌相比较，除了要调整培养基的pH外，还必须控制的条件是 ．配制好的培养基还应进行灭菌处理，一般采用的方法是 ．从功能上看，该培养基是 培养基．

（4）对筛选得到的微生物还需进一步纯化培养以增加菌种的数量，为方便后续的计数，宜采用的纯化方法是 ．

（5）用物理和化学的方法使筛选出的纤维素分解菌破裂后，用 的方法可将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开．分离出的纤维素酶还需进一步鉴定．纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖，根据这一特性，可加入 试剂并水浴加热，判断提取物是否起到了降解纤维素的作用．

40．回答下列有关微生物培养的问题．

（1）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．

①该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量．在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为 ．实验中的接种工具称为 ．

②该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是 ．

（2）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表：“+”表示有，“﹣”表示无）．

（注：在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成红色复合物．）

酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液 水 培养基甲 + + + + ﹣ + + 培养基乙 + + + ﹣ + + + 据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ．

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高考生物 选修一生物技术实践

参与试题解析

一．解答题（共40小题） 1．（2014•湖北模拟）如图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图，请分析并回答：

（1）在鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约

的空间．经过10～12天后，在酸性条件

下用重铬酸钾检测样液，如果颜色变为 灰绿 色，说明产生了酒精．

（2）过程乙中使用的微生物是 醋酸（杆）菌 ，可以从食醋中分离纯化获得，步骤如下： 第一步：配制 固体 （固体/液体）培养基． 第二步：对培养基进行高压蒸汽灭菌．

第三步：接种．微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和 平板划线法 ． 第四步：培养．温度控制在 30﹣35 ℃范围内． 第五步：挑选符合要求的菌落．

（3）在 氧气充足（有氧） 的条件下，如果缺少糖源，乙中的微生物将甲过程的产物变为 乙醛 ，再将其变为醋酸． 2．（2016•赤峰二模）近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品．请分析回答下列问题：

（1）在果醋制作时，运用醋酸菌在供应 氧气 和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，请写出该过程的化学反应式： C2H5OH+O2CH3COOH+H2O ．

（2）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制．用盐腌制时，应注意控制 盐的用量 ；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在 12 %左右． （3）制作泡菜的原理是 乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸 ．蔬菜在腌制过程中，会产生亚盐，在 盐酸酸化 条件下，亚盐与对氨基苯磺酸发生 重氮化 反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成 玫瑰红 色染料． 3．（2016•中山市校级模拟）根据下面的实验装置图（图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）回答问题：

（1）图甲所示装置可用于提取 玫瑰精油 （填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”）． （2）制作果酒时可选用图乙的装置．为适当提高果酒的生产速率，进气口应 先打开后关

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闭 ；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是 既可以放气，又可防止污染 ．

（3）图丙为樱桃果酒生产工艺流程简图，其中冲洗的目的是 洗去浮尘 ．樱桃榨汁前需要除去果柄，此操作是在冲洗之 后 进行的．为了提高樱桃的出汁率，在压榨前可加入一定量的 果胶 酶． （4）若是从混杂的微生物中分离酵母菌应使用 选择 培养基．从微生物培养的角度分析，樱桃果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐和 碳源、氮源 ．

（5）樱桃果酒制作是否成功，发酵后可在酸性条件下用 重铬酸钾 溶液来鉴定．在酒精发酵旺盛时，醋酸菌 不能 （能、不能）将果汁中的糖发酵成醋酸，乳酸菌 不能 （能、不能）将乳酸分解CO2和水． 4．（2012•海南）【生物﹣﹣选修I：生物技术实践】 回答下列关于腐乳制作的问题：

（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品．多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是 毛霉 ，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为 肽 和 氨基酸 ；其产生的 脂肪酶 能将豆腐中的脂肪水解为 甘油 和 脂肪酸 ． （2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制 微生物 生长．

（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤．卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的 风味 ．

（4）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物 （5）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或香味）． 5．（2015•辽宁校级模拟）阅读如下材料，回答下列问题：

资料Ⅰ：相传，清康熙八年，安徽举子王致和，京考未中，在京城做起了卖豆腐的生意．一天，他发现没卖完的豆腐长了白毛，舍不得丢弃，就将豆腐装入坛内撒盐腌了，再密封起来，秋末开坛意外制成了“闻着臭，吃着香”的腐乳．

资料Ⅱ：19世纪中期，法国的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击．在生产过程中出现了葡萄酒变酸、变味的怪事．经研究，法国科学家巴斯德发现，导致生产失败的根源是发酵物中混入了杂菌．

（1）中国的传统发酵技术源远流长，是人类对微生物的利用，其中制作腐乳的微生物主要是 毛霉 ，制作果酒的微生物是酵母菌，它是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，其反应式为 C6H12O6→2C2H5OH+2CO2 ．

（2）在腐乳制作过程中，微生物生长的温度控制在 15～18℃ ；加盐腌制，盐可以析出豆腐中的水分，同时，盐能 抑制微生物的生长，避免豆腐块变质 ． （3）从资料Ⅱ中看出， 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物 是研究和应用微生物的前提．在无菌技术中，对操作者用酒精擦拭双手属于 消毒 ，对金属用具、玻璃器皿、培养基等要进行灭菌，其中，培养基只能用 高压蒸汽 灭菌．

（4）通常在一环境中微生物有多种混合在一起，若要对某种微生物进行纯化，最常用的方法是 平板划线法和稀释涂布平板法 ． 6．（2016•安徽模拟）乳酸茵是存在于人体内的益生菌，能助消化，利于肠道健康，因此常用于酸奶的制作．回答下列问题： （1）与腐乳制作所用微生物相比，乳酸菌在结构上的主要特点是 无核膜包被的细胞核 ． （2）大量生产乳酸菌一般用 液体 ．（填“固体”或“液体”）培养基，培养基中除添加必需的营养成分外，还需要注意控制 无氧 等培养条件．

（3）酸奶制作时杀菌很重要，牛奶一般用 巴氏消毒 法，所用仪器如接种环常用 灼烧灭菌 法，接种室用 紫外线灭菌 法．

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（4）含有抗生素的牛奶 不适合 （填“适合”或“不适合”）作为酸奶的制作原料．

（5）乳酸菌也常用于泡菜的制作，腌制泡菜过程中亚盐含量的变化是 先增加后减少 ． 7．（2016•唐山一模）人们的日常生活与传统发酵技术密切相关．请回答下列相关问题： （1）腐乳制作中主要利用了微生物产生的 蛋白 酶和脂肪酶．

（2）在制作果醋、腐乳、泡菜的过程中需要提供充足氧气的是 制作果醋 ．在发酵产物制作过程中都需要培养微生物，为防止杂菌污染，需要对培养液（基）和培养器皿进行 灭菌 （填“消毒”或“灭菌”）．

（3）利用酵母菌酿酒时，一开始持续通入空气，导致酵母菌数量 增多 （填“增多”、“不变”或“减少”），然后再密封，使酒精 增产 （填“增产”、“减产”或“不产生”）．

（4）果酒发酵后是否有酒精产生，可以用 重铬酸钾 来检验，在酸性条件下呈现灰绿色． （5）纯化果酒制作的菌种时，利用 固体 （固体、液体）培养基．接种时常用的方法有平板划线法和 稀释涂布平板 法． 8．（2016•梅州二模）近年来．纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利于不同微生物的发酵作用制作的美味食品．请回答：

（1）腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种到豆腐上，这样可以 避免其他菌种的污染，保证产品的质量 ．腐乳制作的过程中，加盐的作用是 析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬 和 抑制微生物的生长，避免豆腐块变质 ．从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于 培养基 ．

（2）在果醋制作时，醋酸菌在 氧气 供应和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用 酒精 生成醋酸．

（3）制作泡菜的原理是 乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸 ． （4）胡萝卜素是重要的药物和食品添加剂，在胡萝卜素的萃取中，所用的有机萃取溶剂应该具有较高的 沸点 ，以便胡萝卜素能充分溶解其中．对萃取的胡萝卜素样品和标准样品进行点样层析时，如果出现 对应层析带 现象，则说明胡萝卜素提取成功． 9．（2017•甘肃一模）2016年初，电视台“手艺”栏目播放了《臭味相投》，介绍了腐乳的手工制作和王致和厂工业化生产流程，传播了腐乳制作展示的同时，发扬了中华传统文化．分析下列有关腐乳制作的问题：

（1）腐乳制作过程用到的主要微生物是 毛霉 ，该微生物生长的最适温度为 15﹣18℃ ．

（2）加盐腌制过程中，离瓶口越近的，加盐量越 多 ，原因 原因离瓶口越近杂菌污染的可能性更大 ．和腐乳风味关系最密切的配料是 卤汤 ，其中加酒的目的是 抑制微生物生长 和 使腐乳具有独特的香味 ． （3）乳腐外部致密的一层皮是 毛霉的菌丝 ，而果酒变酸后表面一层菌膜是 醋酸菌 ． 10．（2014•鄂尔多斯一模）腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵的大豆食品，如臭豆腐、酱豆腐等，该食品味道鲜美，易于消化吸收，而腐乳本身又便于保存，所以深受人们的喜欢．如图是腐乳制作的流程示意图，根据流程回答问题．

（1）流程图中未写出的程序是 加卤汤装瓶 ．

（2）含水量为 70% 左右的豆腐适合用来做腐乳．制作过程中，加盐的作用是 析出水分使豆腐块变硬同时抑制微生物生长 ．

（3）制作腐乳的原理是：毛霉等微生物产生的 蛋白酶 能将豆腐中的蛋白质分解成小分

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子的肽和氨基酸； 脂肪酶 可将脂肪分解为甘油和脂肪酸．

（4）传统制作腐乳，豆腐块上的毛霉来自 空气中的毛霉孢子 ，现代腐乳生产是在严格 无菌 的条件下，将优良的毛霉菌种直接接种在豆腐上． （5）影响腐乳的风味和质量的因素是 盐的用量，酒的用量，发酵温度，发酵时间等 ． （至少列举两项） 11．（2016•新课标Ⅲ）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用 无菌水 对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是 泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落 ．

（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有 中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸 和 利于乳酸菌的识别和分离 ．分离纯化时应挑选出 在平板上有透明圈 的菌落作为候选菌．

（3）乳酸菌在﹣20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的 甘油 （填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）． 12．（2016•宜昌一模）泡菜是我国的传统食品之一，但制作过程中产生的亚盐对人体健康有潜在危害．根据实验研究，得到相关数据如图．

（1）与酵母菌相比，乳酸菌最主要的结构特点是 没有以核膜为界限的细胞核（或无成型的细胞核） ．

（2）制作泡菜的原理是 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸 ；制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是 创造无氧环境 ．

（3）据图分析，第8天后的泡菜更适于食用，理由是 亚盐含量较低 ．可用 比色 法检测泡菜中亚盐的含量，因为亚盐能与某些化学物质发生反应后形成 玫瑰红 色染料．

（4）若要测定泡菜中乳酸菌的数量，可在显微镜下用 血细胞计数板（血球计数板） 直接计数；泡菜制作过程中pH值呈下降趋势，原因是 乳酸积累 ．

13．（2013秋•青山区校级期末）某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚盐含量变化”开展了研究，操作如下：某年1月4日下午选取1、2、3号三只相同的泡菜坛，在每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜0.6kg，再分别倒入相同量的煮沸并冷却的10%的盐水，将坛密封，置于同一环境中．封坛前进行第一次取样测定亚盐含量，后来定时测定，结果如图．请问：

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（1）实验中盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是： 加热煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响 在腌制过程中，会出现坛中溶液量增加，这是由 外界溶液浓度过高使细胞渗透失水 ．

（2）在腌制泡菜的过程中，起主要作用的微生物是 乳酸菌 ，用水封坛的作用是 提供无氧环境 ；

（3）该小组对实验数据的处理方法是否合理？ 不合理 ．说明理由： 应将三个坛中，每次测定的亚盐含量分别记录，求出平均值，然后以时间为横坐标，亚盐含量为纵坐标做曲线图 ．

（4）测定亚盐含量的方法是 比色法 ，其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成 玫瑰红 色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚盐的含量．

（5）实验中三只坛中产生的亚盐含量存在差异，最可能的原因是： 各坛中微生物种类和数量可能存在差异 ． 14．（2016•杭锦后旗校级二模）农村中泡菜的制作方法是：新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”．密封后置于阴凉处，适宜环境温度为28～30℃．有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”，据此分析，回答下列问题．

（1）用白酒擦拭泡菜坛的目的是 消毒 ．

（2）若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是 盐过多，抑制了乳酸菌发酵 ．

（3）制作过程中，需要加入盐水，其中清水与盐的比例应为 4：1 ，加入“陈泡菜水”的作用是 提供乳酸菌菌种 ．

（4）若要获得优良乳酸菌菌种，应选用培养基培养．培养基中应含有 碳源 、 氮源 、水和无机盐，同时需要在培养基中添加 维生素 ．纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有 平板划线法或稀释涂布平板法 ．培养时还需提供 无氧 条件． 15．（2015•武汉校级模拟）泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快、亚盐降解能力强的乳酸菌，科研人员做了如下实验．请回答问题：

（1）在无菌操作下，使用无菌水对泡菜汁进行 梯度稀释 ，将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO3的乳酸细菌培养基（MRS培养基）平板上．在适宜条件下培养后，挑取有 透明圈 的菌落，继续在MRS平板上用 平板划线 法分离，得到单菌落．

（2）取分离到的乳酸菌接入MRS液体培养基中，间隔取样测定pH，目的是筛选出 产酸速度较快 的乳酸菌．

（3）取上一步筛选出的乳酸菌接入含有NaNO2的MRS培养基中，培养一段时间后，用 比色法 法测定NaNO2的含量，测定前需要配备 标准显色液 ，此过程的目的是筛选出 降解能力强 的菌株．

（4）乳酸菌细胞结构的最主要特点是 没有核膜包围的细胞核 ，其代谢类型为 异养厌氧型 ． 16．（2016•陕西校级模拟）回答下列有关泡菜制作的习题：

（1）制作泡菜时，所用盐水煮沸，其目的是 消毒杀菌 ．为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 陈泡菜液含有乳酸菌，为泡菜发酵提供菌种 ．

（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 无氧呼吸 的过程．

（3）泡菜制作过程中影响亚盐含量的因素有 温度 、食盐用量和 腌制时间 等．

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（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 乳酸菌先增后减，其他杂菌逐渐减少 ． 17．（2016•山东三模）根据如图的实验装置图（如图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）回答问题：

（1）图甲所示装置可用于提取 玫瑰精油 （填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”）． （2）制作果酒时可选用图乙的装置．为适当提高果酒的生产速率，进气口应 先打开后关闭 ；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是 既可以放气，又可防止污染 ．

（3）图丙为樱桃果酒生产工艺流程简图，其中冲洗的目的是 洗去浮尘 ．樱桃榨汁前需要除去果柄，此操作是在冲洗之 后 （填“前”或“后”）进行的．为了提高樱桃的出汁率，在压榨前可加入一定量的 果胶 酶． （4）若是从混杂的微生物中分离酵母菌应使用 选择 培养基．从微生物培养的角度分析，樱桃果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐和 碳源、氮源 ．

（5）樱桃果酒制作是否成功，发酵后可在酸性条件下用 重铬酸钾 溶液来鉴定．在酒精发酵旺盛时，醋酸菌 不能 （填“能”或“不能）将果汁中的糖发酵成醋酸． 18．（2016•会泽县二模）下面是与植物芳香油的提取相关的问题，请回答．

（1）玫瑰精油的提取可使用图1所示装置，这种方法叫 蒸馏 法；蒸馏时收集的蒸馏液 不是 （是/不是）纯的玫瑰精油．

（2）橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用 压榨 法提取橘皮精油． （3）胡萝卜素是 橘黄 色的结晶．从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是 萃取 法，加热时应该注意控制 温度和时间 ，一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成 反 比． （4）将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，图2为鉴定结果示意图，请据图回答．A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是 A、D ． 19．（2015•庆阳模拟）如图为提取玫瑰精油的蒸馏装置图，请回答下列有关问题：

（1）用于提取玫瑰精油的玫瑰花要在花开的 盛花期 （填时期）采收，且玫瑰花瓣与清水的质量比一般为 1：4 ．

（2）玫瑰精油具有 易挥发，难溶于水 的性质，所以可采用该装置提取．该装置中收集到的产物为 油水混合物 ，装置中水和原料量一定时，则蒸馏过程中影响玫瑰精油提取量的主要因素有 蒸馏时间和蒸馏温度 ．

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（3）该装置中冷凝管的冷却水从 下 （填“上”或“下”）口进入，蒸馏后获得的白色乳液加入NaCl后用 分液漏斗 （填装置）进行处理，分离的油层中，有一定的水分，此时可加入 无水硫酸钠 进行吸水．

20．（2016•黄山三模）根据下面装置图，回答有关问题：

（1）装置甲表示的是植物芳香油提取中的 水蒸气蒸馏法（水中蒸馏法） 法，常用于玫瑰精油的提取；该装置还可用于胡萝卜素提取中的 浓缩 过程，在进行该过程前，要过滤，其目的是 除去萃取液中的不溶物 ．

（2）装置乙常用于果酒、果醋的制作，在果酒制作时起作用的微生物是 酵母菌 ，它与果醋制作的微生物相比，不同的结构特点是 具有成形的细胞核（有核膜） ．如果该装置用于制作酸奶，对该装置如何处理？ 关闭进气口和排气口 ．

（3）装置丙表示的方法为 萃取法 ，在加热的瓶口安装了回流冷凝装置，其作用是 防止加热时有机溶剂（萃取剂）的挥发 ．要想取得好的效果，必须保证原料颗粒小，温度高，时间长，目的是让提取的物质 充分溶解 ． 21．（2016•哈尔滨校级一模）如图所示为某同学绘制的玫瑰精油的提取装置．请回答下列问题：

（1）分离装置中常加入氯化钠，目的是 加速油水分层 ．制取纯玫瑰精油时，加入无水硫酸钠的目的是 除去油层中的水分 ．

（2）植物芳香油的提取方法有 蒸馏法 、 压榨法 、 萃取法 ，由于玫瑰精油具有化学性质稳定、 难 （难或易）溶于水等特性，而适宜用图示方法提取．

（3）提取过程中，许多因素都会影响玫瑰精油的品质，例如 蒸馏温度太高，时间太短 ，会导致产品的品质比较差，而如果提高品质，就需要延长 蒸馏时间 ．

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22．（2016•海口校级二模）根据植物芳香油提取的相关知识，回答下列问题：

（1）玫瑰精油的提取可使用如图所示装置，这种方法叫 水蒸气蒸馏 法；蒸馏时收集的蒸馏液 不是 （填“是”或“不是”）纯的玫瑰精油，原因是 玫瑰精油和水的混合物 ．进水口是图中的 ③ （填图中的编号）． （2）柠檬芳香油的提取常用 压榨 法． （3）用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是 增加水的密度，便于油水分离 ．分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是 吸收残留的水分 ，除去固体硫酸钠的常用方法是 过滤 ．

23．（2013•怀化二模）[生物﹣﹣选修1生物技术实践]

从胡萝卜中提取的橘黄色物质，包括多种结构类似物，统称为胡萝卜素．胡萝卜素通常是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂． 图1为提取胡萝卜素的装置示意图．图2为胡萝卜素粗品鉴定装置示意图，请据图回答下列问题：

（1）除了可以从植物中提取天然胡萝卜素外，还可以从养殖的岩藻中获得或者利用 微生物发酵 生产．

（2）胡萝卜素的萃取实验流程为：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→ 过滤 →浓缩→胡萝卜素．萃取过程中采用水浴加热的原因是： 有机溶剂遇明火易发生爆炸 ． （3）在加热瓶口安装冷凝回流装置的目的是 防止加热时有机溶剂挥发 ．

（4）在乙醇、丙酮、石油醚、乙醚这四种有机溶剂中，最适宜用作提取胡萝卜素的萃取剂是 石油醚 ．萃取的效率主要取决于萃取剂的 性质和使用量 ．

（5）胡萝卜素粗品鉴定的方法名称是 纸层析法 ．如果层析液没及e会导致 胡萝卜素溶解在层析液中 ，而使鉴定失败． 24．（2015春•资阳校级期中）如图为提取胡萝卜素的装置示意图，请回答有关问题：

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（1）胡萝卜素萃取的效率主要取决于 萃取剂的性质 和 使用量 ，同时还受到 原料颗粒的大小 、 紧密程度 、 含水量、萃取的温度 和 时间 等条件的影响．

（2）一般来说，要想萃取效果好，要保证 原料颗粒小，萃取温度高，时间长，需要提取的物质就能充分溶解，萃取效果就好 ．

（3）萃取过程应该避免明火加热，采用 水浴 加热，其原因是 因为有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸 ．

（4）在加热瓶口安装冷凝回流装置的目的是 为了防止加热时有机溶剂挥发 ． 25．（2016•海口校级四模）请回答下列与植物有效成分的提取相关的问题：

（1）玫瑰精油提取，当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是 随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后不再增加 ．

（2）提取玫瑰精油的过程中进行冷却的原因是 防止玫瑰精油随水蒸气挥发而流失 ． （3）橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用 压榨 法提取橘皮精油，其中将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡的目的是 提高出油率 ．

（4）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是 萃取 法；一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成 反 比．

（5）将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，右图为鉴定结果示意图，则甲、乙中属于胡萝卜素层析带的是 甲 ．

26．（2016•新课标Ⅰ）空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降．某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况．实验步骤如下：

①配置培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）； ②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数． 回答下列问题：

（1）该培养基中微生物所需的氮来源于 牛肉膏和蛋白胨 ．若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是 琼脂 ．

（2）步骤③中，实验组的操作是 将各实验组平板放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间 ．

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（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了 污染 现象．若将30（即36﹣6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法 不正确 （填“正确”或“不正确”）． 27．（2015•山东模拟）多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用，是土壤、河水中常见的污染物之一．如图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要步骤．请回答：

（1）步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能 增加培养液中的溶氧量（或增加培养液中的含氧量） ．

（2）步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中，在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是 线条末端细菌的数目比线条起始处要少（或能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落） ．采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是 防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基（或避免培养基中水分的过快挥发）

（3）接种环通过灼烧来灭菌，完成步骤④中划线操作，共需灼烧接种环 6 次

（4）为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株，研究人员又对菌种Q进行了诱变处理，得到突变株K．为了进一步鉴定菌株K并比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力，设计了下列实验，请补全实验步骤：

①取9只锥形瓶均分成三组，编号A、B、C

②向A、B、C三组锥形瓶中加入 等量的以多环芳烃菲为唯一碳源 的培养液．

③向A、B、C三组培养液中分别加入 等量的无菌水、菌株Q菌液和突变株K菌液 ． ④28℃恒温培养3天后，测定 锥形瓶中多环芳烃菲的降解率 ． 28．（2014•江西校级二模）【生物﹣﹣选修1生物技术实践专题】

从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．

（1）接种前要对培养基进行 高压蒸汽灭菌 处理．在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在 无菌 条件下进行．

（2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．如培养纤维素分解菌的菌样应从 富含纤维素 环境中采集． （3）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制 选择 培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的 碳源 ．

（4）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是 刚果红 ，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生 透明圈 来筛选纤维素分解菌．某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是 菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够） ． 29．（2017•酒泉一模）据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标，“细菌门”

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事件引起公众普遍关注．葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环．请回答下列问题．

（1）某兴趣小组欲检测某果汁类食品中含有葡萄球菌，请帮他们完善下列步骤．

①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨．NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节PH，分装到锥形瓶后进行 灭菌 ，在无菌状态下加入卵黄液（100mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀后立即倒平板．

②接种：取待检测果汁2.5ml加入22.5mL灭菌生理盐水中，制成接种样液． 实验组：将接种样液用 平板划线 法接种在含卵黄的固体培养基上． 对照组：将 无菌生理水 用划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为 空白 对照．

将上述接种后的培养皿同时放在36℃的恒温箱中培养48h． ③观察：观察培养基表面 是否出现周围有乳浊环的菌落 ．

（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供 碳源和氮源 ． 葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来，此培养基属于 选择 培养基．

（3）若要统计某土壤样品中该活菌数目，宜采用 稀释涂布平板 法． 30．（2016•上栗县二模）在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行 稀释 处理．

（2）要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中的培养基应具有的特点是：在 无氮固体 的培养基中加入 该种除草剂 ．

（3）在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 培养基中缺少这些细菌可利用的氮源 ．

（4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是 氮气 ，有透明带菌落利用的氮源主要是 该除草剂 ，据此可筛选出目的菌．

（5）若实验接种时用的是稀释涂布平板法，在统计菌落数目时得到4个平板，统计的数目分别为21、213、257、278，则对数据处理后取平均值计数为 249 ，该方法往往比活菌的实际数目偏 低 （高/低）． 31．（2016•奉贤区一模）I．培养基的配制与培养是微生物实验中的一个重要环节． （1）图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步

骤之一，一般称为 倒平板 ．配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行 调pH ，培养基在接种前要进行 高温高压 灭菌，灭菌是否彻底或是否被污染需要检测，方法是 未接种的培养基在放置一段时间后，观察培养基上是否有菌落产生 ．

Ⅱ．从自然菌样中筛选理想菌种的步骤是：采集菌样 富集培养 纯种分离．

（2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然

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后再按一定的方法分离、纯化．培养嗜盐菌的菌样应从 海滩等高盐 环境采集．

（3）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择 以淀粉为唯一碳源 的培养基，并在 高温 条件下培养．

（4）图2和图3是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，获得图2效果的接种方法是 稀释涂布平板法 ，获得图3效果的接种方法是 平板划线法 ．

32．（2016•铜鼓县一模）为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制了如表培养基配方： K2HPO4 pH 蛋白胨 乳糖 蔗糖 伊红 美蓝 蒸馏水 10g 5g 5g 2g 0.4g 0.065g 100mL 7.2 （1）该培养基所含的碳源有 乳糖、蔗糖、蛋白胨 ，其功能是 主要用于构成微生物的细胞物质和代谢产物 ．

（2）该培养基所含的氮源有 蛋白胨 ，其功能是 主要用于合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物 ．

（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是 水和无机盐 ． （4）该细菌的同化作用类型是 异养型 ． （5）该培养基可用来鉴别哪种细菌？ B

A．霉菌 B．大肠杆菌 C．酵母菌 D．乳酸菌． 33．（2015春•宿迁校级期中）2011年，荷兰皇家航空公司宣布，从9月份起，启用以生物柴油（即俗称的“地沟油”）为燃料的客机执飞阿姆斯特丹至巴黎的航班，以减少碳排放．科学家发现，在微生物M（单细胞）产生的脂肪酶作用下，可以将地沟油提取的植物油与甲醇反应能够合成生物柴油．

（1）用培养基培养微生物时，培养基中应有 碳源 、 氮源 、 水 和 无机盐 等营养，同时还必须满足微生物生长对 特殊营养物质 、 pH 、 氧气 的要求．在筛选产脂肪酶的微生物M时，应用 选择 培养基，可以在培养基中添加 植物油 作为唯一碳源．

（2）培养基灭菌采用的最适方法是 高压蒸汽灭菌 法．

（3）图示是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图，过程一的接种方法是 平板划线法 ，过程二的接种方法是 稀释涂布平板法 ，此方法计数的微生物M

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的数目 ＜ （＞、=、＜）实际活菌数，接种后应注意培皿基要 倒置 放置． 34．（2015秋•钦州校级月考）每生物兴趣小组为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如下表所示，实验步骤表格所示．请分析回答问题： KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4•7H2O 0.2g 1g 葡萄糖 10g 尿素 15g 琼脂 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000mL （1）简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 酚红 指示剂，细菌合成的 脲酶 将尿素分解为 氨 ，pH升高，使指示剂变为红色．

（2）培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌，这种培养基属于 选择 培养基．

（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的 尿素 和 葡萄糖 ，实验中需要振荡培养，原因是 为目的菌提供氧气 ．

（4）图1是利用 平板划线 法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．通常还可以 稀释涂布平板法 方法分离到一个细胞繁殖形成的菌落 （5）关于图1的操作方法和结果，叙述正确的是 ABCD ． A．操作时要将接种环放在火焰上灼烧灭菌 B．划线操作须在火焰旁进行

C．多次划线后培养才可以分离到一个细胞繁殖形成的菌落 D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

35．（2014•兰州模拟）尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如表所示，实验步骤如图所示，请分析回答问题： KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4•7H2O 0.2g 10g 葡萄糖 1g 尿素 15g 琼脂 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL （1）此培养基能否用于植物组织培养？为什么？ 不能，缺乏植物激素 ．

（2）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图．则获得图A效果的接种方法是 稀释涂布平板法 ，图B效果的接种方法是 平板划线法 ，一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是 菌液浓度过高 （答出一

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条即可）．

（3）“目的菌”生长所需的氮源来自培养基中的 尿素 ，其同化作用类型是 异养型 ． （4）培养基中加入尿素的目的是筛选到 能高效降解尿素的细菌（目的菌）， ，这种培养基从功能上属于 选择 培养基． 36．（2013•辽宁二模）[生物﹣﹣选修l生物技术实践]

下列是对土壤微生物开展探究活动的三个案例，请在相应的空白处作答． （1）案例l：探究落叶在土壤微生物的作用下是否发生腐烂（分解）． 设计思路： 组对照组 实验组 别 处不做处理的带落叶的土壤 处理过的带落叶的土壤 理 将等量的带落叶的土壤，用带有编号的相同的塑料袋分别包扎好，并埋在5cm深的土情壤中 况 对实验组土壤应该进行 灭菌 处理，尽可能排除 土壤微生物 的作用． （2）案例Ⅱ：探究土壤微生物对淀粉的分解作用． 实验步骤：

①将取自农田的土壤制成土壤浸出液，放在烧杯中静置一段时间．

②另取两只烧杯，编号为A、B，放入等量的淀粉糊．在A烧杯中加入30mL土壤浸出液，B烧杯中加入 30 mL（等量）蒸馏水（无菌水） ． ③在室温条件下放置7天后，从A烧杯中取20mL溶液，分别加入A1和A2两支试管各10mL；从B烧杯中取20mL溶液，分别加入B1和B2两支试管各10mL．

④在A1和B1中加入碘液；在A2和B2中加入 （等量的）斐林试剂 ，并进行 水浴加热 处理．

⑤观察各试管的 颜色变化 ，记录实验结果．

（3）案例Ⅲ：探究土壤微生物中是否含有分解纤维素的细菌的实验过程中，应将土壤浸出液接种在以 纤维素 为惟一碳源的培养基上，并用 刚果红 （试剂）加以鉴别． 37．（2015•湖北一模）某些农作物秸秆富含纤维素，纤维素经过水解可以形成葡萄糖，葡萄糖再经过发酵可以生产酒精．如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程，请回答下列问题：

（1）农作物秸秆含有丰富的纤维素，纤维素要经过纤维素分解菌分解成葡萄糖．人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌．分离纤维素分解菌常用的方法是 刚果红染色法 ．其实验流程是；土壤取样→选择培养→ 梯度稀释 →将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生 透明圈 的菌落．

（2）纤维素分解菌能合成纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即 C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶 ．前两种酶使纤维素分解成 纤维二糖 ，第三种酶将它分解成葡萄糖． （3）图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌，在酒精发酵时一般将温度控制在 18﹣25 ℃．发酵后是否有酒精产生，可以用 酸性重铬酸钾 来检验．

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（4）利用葡萄能生产果酒，进而生产果醋，生产果醋常用的菌种是醋酸杆菌，醋酸杆菌与酵母菌在代谢类型上的区别是 醋酸杆菌是好氧性的，酵母菌是兼性厌氧型 ． 38．（2016•三水区校级一模）有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等．研究人员用化合物A、盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物．分析回答问题：

（1）培养基中加入的化合物A是 纤维素 ，为微生物的生长提供 碳源 ，这种培养基属于 选择 培养基．

（2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入 刚果红 ． （3）在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度．若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是 接种环 ，操作时采用 灼烧 灭菌的方法；还可用 稀释涂布平板 方法操作．

（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是 防止造成环境污染 ． 39．（2015•河南模拟）食物中的纤维素（即膳食纤维）对人体的健康有着重要的作用，其主要存在于蔬菜和粗加工的谷类中，有促进肠道蠕动、利于粪便排出等功能．但纤维素不能被人体吸收，因为人体缺乏分解纤维素的酶．某校生物兴趣小组开展了以下探究纤维素酶研究的工作，请回答下列问题：

（1）纤维素酶是一种 复合 酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖昔酶三种，其中能够将纤维二糖分解为葡萄糖的是 葡萄糖苷酶 ．

（2）自然界中不少微生物都具有分解纤维素的能力．要从土壤中筛选含有纤维素酶的微生物即纤维素分解菌，应在含有纤维素丰富的 枯枝落叶多的腐殖 土中采样．取回的土样中含有多种微生物，兴趣小组可在培养基中加入 刚果红 来帮助筛选纤维素分解菌，目标菌落的特征是 存在以该菌落为中心的透明圈 ．为了提高酶的产量，研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多纤维素酶的菌株，把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养，观察两组菌株菌落周围的情况，选出 透明圈大的 （填“透明圈大的”“透明圈小的”或“无透明固的”）菌株即为所需菌株．

（3）马、牛、羊等食草动物也具有消化纤维素的能力．若从马的胃中分离出纤维素分解菌，与从土壤中分离出的纤维素分解菌相比较，除了要调整培养基的pH外，还必须控制的条件是 保持无氧环境 ．配制好的培养基还应进行灭菌处理，一般采用的方法是 高压蒸汽灭菌法 ．从功能上看，该培养基是 选择 培养基．

（4）对筛选得到的微生物还需进一步纯化培养以增加菌种的数量，为方便后续的计数，宜采用的纯化方法是 稀释涂布平板法 ．

（5）用物理和化学的方法使筛选出的纤维素分解菌破裂后，用 离心 的方法可将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开．分离出的纤维素酶还需进一步鉴定．纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖，根据这一特性，可加入 斐林 试剂并水浴加热，判断提取物是否起到了降解纤维素的作用． 40．（2015•松江区一模）回答下列有关微生物培养的问题．

（1）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．

①该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量．在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 检测培养基平板灭菌是否合格 ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为 3.8×107 ．实

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验中的接种工具称为 无菌玻璃刮铲（涂布器） ．

②该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过 灼烧 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 ．

（2）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表：“+”表示有，“﹣”表示无）．

（注：在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成红色复合物．）

酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液 水 培养基甲 + + + + ﹣ + + 培养基乙 + + + ﹣ + + + 据表判断，培养基甲 不能 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 液体培养基不能分离单菌落 ；培养基乙 不能 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 乙培养基中没有纤维素，不会形成CR﹣纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌 ．

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