２０１３年２月 食品硪究与并发 Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ 分离提取 ＿＝＝２８ 第３４卷第３期 ＤＯＩ：１０．３９６９０．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１３．０３．００８ 龙眼核总生物碱提取工艺 贤景春。陈晨 （泉州师范学院化学与生命科学学院，福建泉州３６２０００） 摘要：采用乙醇浸提法研究了龙眼核总生物碱的提取工艺，探讨了各种因素对总生物碱提取的影响，并用正交试验 优化对总生物碱的提取最佳工艺进行了优化。结果表明，最佳参数组合是温度６０℃，提取时间２ ｈ，乙醇浓度７０％， 料液比ｌ：１５（ｇ／ｍＬ）。在此条件下，龙眼核总生物碱的提取率为２．３３％。 关键词：龙眼核；提取；总生物碱 Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｔｏｔａｌ Ａｌｋａｌｏｉｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｌｏｎｇａｎ Ｓｅｅｄ ＸＩＡＮ Ｊｉｎｇ－ｃｈｕｎ，ＣＨＥＮ Ｃｈｅｎ （Ｔｈｅ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｑｕａｎｚｈｏｕ Ｎｏｒｍａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｑｕａｎｚｈｏｕ ３６２０００，Ｆｕｊｉａｎ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｉｍ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄ ｆｒｏｍ ｌｏｎｇａｎ ｓｅｅｄ．Ｔｈｉｓ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｅｆｆｅｅｔ ｏｆ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｎｓｔｒｕｕｍ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｔｉｍｅ，ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ． Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｃｈｏｓｅｎ ａｆｔｅｒ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ａｎａｌｙｓｉ．Ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ａｒｅ ７０％ｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ６０ ｏＣ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｂｙ ２ ｈ，ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌｔｏ ｌｉｑｕｉｄ ｏｎ １：１５（ｇ／ｍＬ）．Ｉｎ ｔｈｉｓ ｅａｓｅ，ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄ ｃａｎ ｒｅａｃｈ ｕｐ ｔｏ ２．３３％． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｌｏｎｇａｎ ｃｏｒｅ；ｅｘｔｒａｃｔ；ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄ 生物碱是含负氧化态氮原子的、存在于生物有机 １材料和方法 体中的环状化合物，具有多种生物活性，在植物体内 还具有良好的分布和较强的输导能力，对癌症疼痛有 一１．１仪器与试剂 ７２１Ｅ型可见分光光度计：上海光谱仪器有限公 定的缓解作用ｌｌｌ，生物碱抗癌作用，尤其是对肺癌的 司；离心机：厦门精艺兴业科技有限公司；电子天平：北 京赛多利斯仪器系统有限公司；循环水式多用真空 泵：郑州长城科工贸有限公司。龙眼核：福建泉州；盐 酸水苏碱标准品：上海同田生物技术有限公司；雷氏 抑制功效已经引起人类的关注。龙眼是著名的亚热带 水果，在我国南方、尤其是福建泉州盛产。龙眼核的重 量占龙眼果实鲜重的１７％，至今还没有综合利用，每 年废弃的龙眼核重量达几十万ｔ，除龙眼果肉具有很 盐、碘化铋钾：天津市光复精细化工研究所；乙醇：上 海联试化工试剂有限公司。 １．２实验方法 高的营养价值外，龙眼核也有显著的活性功效圈。如能 利用龙眼核开发出潜力较高的天然产物，变废为宝， 既能保护环境，又能增加经济效益。本文以乙醇浸提 法提取龙眼核总生物碱，研究提取总生物碱物质的最 １．２．１标准工作曲线的绘制 精确称取盐酸水苏碱对照品１０．００ ｍｇ于２５ ｍＬ 容量瓶中，用０．１ｍｏｌ／Ｌ的盐酸溶液溶解并定容。再从中 佳工艺条件，为龙眼核保健产品的开发提供一定理论 参考 分别移取０．Ｏ０、０、２．Ｏ０、４．Ｏ０、６．Ｏ０、８．Ｏ０ ｍＬ于２５ ｍＬ容 量瓶中，各加入新鲜配制的２％雷氏盐溶液３．００ ｍＬ， 摇匀，用０．１ ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液溶解并定容，离心。取上层 澄清液于５２０ ｎｍ波长处测定吸光度，以△Ａ（空白溶 液的吸光度Ａ。值减去对照品的Ａ值）对水苏碱浓度ｃ 作图同，绘制标准曲线（图１），回归方程为：△Ａ＝０．４７０ ３ Ｃ＋０．００４ ８ 基金项目：泉州市科技计划项目（２００７Ｎ４）；泉州师范学院硕士学位 授予单位立项建设化学学科资助 作者简介：贤景春（１９５５一），女（汉），教授，本科，主要从事配位化学 研究。 分离提取 贤景春，等：龙眼核总生物碱提取工艺 ０．０３５ ０．０３０ ０．０２５ ｑ ０．０２０ 褂 ｛｝｛Ｏ．０１５ ０．０１０ ０．００５ ０．Ｏｏｏ Ｏ． 浓度／（ｍｇ／ｍＬ） 图１水苏碱的标准工作曲线 Ｆｉｇ．１ Ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｏｆ Ｓｔａｃｈｙｄｒｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ １．２．２提取率的测定 称取１．０ ｇ干燥的龙眼核粉末，置于锥形瓶中，按 照单因素条件浸提。冷却，抽虑，得滤液，用０．１ ｍｏｌ／Ｌ 的盐酸定容至５０ ｍＬ。从此液中移取１０ ｍＬ置于２５ ｍＬ 容量瓶中，加人新鲜配制的２％雷氏盐溶液３．００ ｍＬ， 摇匀，用０．１ ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液溶解并定容，离心 。取上 层澄清液于５２０ ｌｌｍ波长处测定吸光度。 ２结果与讨论 ２．１乙醇浓度对提取率的影响 在提取温度为６０℃，料液比为１：２０，提取时间２ ｈ 的条件下，乙醇浓度对龙眼核中总生物碱类物质的提 取率的影响如图２所示。 褂 乙醇浓度／（ｍｇ／ｍＬ） 图２乙醇浓度对提取率的影响 Ｆｉｇ．２ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ 由图２可知：随着乙醇浓度的提高，生物碱类物 质的提取率也增加，在乙醇浓度为７０％时出现峰值。 乙醇作为浸提溶剂的较适浓度范围为６Ｏ％～８０％，因 此选择乙醇浓度６０％、７０％、８０％作为正交试验的较 优水平。 ２９＝＝－－ ２．２提取时间对提取率的影响 在温度为６０℃，料液比为１：２０，乙醇浓度为７０％ 的条件下，提取不同的时间，结果见图３。 谆 皑 时间／ｈ 图３时间对提取率的影响 Ｆｉｇ．３ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｆｏｔｉｍｅ ｏｎ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ 当提取时间为２ ｈ时，提取效果最好。 ２＿３提取温度对提取率的影响 在乙醇浓度为７０％，料液比为１：２０，提取时间为 ２ ｈ，不同温度的条件下进行提取，结果如图４所示。 量 温度 图４温度对提取率的影响 Ｆｉｇ．４ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｏｔｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ 由图４可知，在温度较低时，随着温度的升高，提 取率不断加大，在６０℃出现峰值。当温度超过６０℃ 后，总生物碱提取率有所下降。 ２．４料液比度对提取率的影响 在提取温度为６０℃，乙醇浓度为７０％，提取时间 为２ ｈ，不同料液比的条件下测定的提取率如图５所 示。结果表明，料液比为１：２０的提取效果达到最佳，当 料液比为１：２０后增大，总生物碱提取率反而减小。 ２．５工艺条件优化 根据单因素试验，温度、料液比、时间、乙醇浓度等 因素对生物碱类提取率均具有很大影响。为了对总生 物碱提取工艺进行优化，选取实验因素水平（见表１）， ＩＪ９（３ ）为正交试验阁，见表２。 ３０ 贤景春，等：龙眼核总生物碱提取工艺 分离提取 料 浓度／（ｍｇ／ｍＬ） 图５料液比对提取率的影响 Ｆｉｇ．５ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｗａｔｅｒ ｄｏｓａｇｅ ｏｎ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ 表１因素水平表 Ｔａｂｌｅ １ Ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ 从表２可以看出，各因素对提取效果影响的大小 顺序是：Ａ＞Ｃ＞Ｂ＞Ｄ，即料液比对提取的效果影响最大， 其次是温度，优化后的提取工艺是Ａ。Ｂ ｃ２Ｄ：。在此条件 下进行 组平行实验，测得平均提取率为２．３３％，正 交试验优化得出的提取工艺较理想。 ３结论 研究结果表明，龙眼核中除了含有黄酮和多酚 外，还含有生物碱，而且含量较高。对生物碱的提取影 响因素较多，其主要因素是浸提温度、溶剂浓度、提取 时间和料液比等。正交试验得出的最佳参数是温度 ６０℃，提取时间２ ｈ，乙醇浓度７０％，料液比１：１５。在 这个条件下，龙眼核中总生物碱的提取率可达到 ２．３３％。生物碱作为一类具有药理活性的物质，在临 床上的应用倍受关注。由于化学合成生物碱成本高且 活性低，最佳途径是从天然植物中获取，因此对天然 表２ Ｌ （３ ）正交试验 Ｔａｂｌｅ ２ Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｐｏｌａｒ ｄｉ仃ｅｒｅｎｃｅ 植物生物碱的测定和提取具有重要意义［６１。 参考文献： （１］薛广厚，范海延，李航，等．生物碱在植物源农药中的应用研究ｆＪ１＿ 北方园艺，２００９（６）：１３１—１３４ ［２］ 肖更生，黄儒强，曾庆孝，等．龙眼核的营养成分［ 食品科技， ２００４（１）：９３—９４ ［３】高岐，刘宏文．微波法提取益母草中总生物碱含量的研究『Ｊ１＿安 徽农业科学，２００９。３７（２）：６４６—６９１ ［４］辛海量，赵玉海，林峰．苦豆草总生物碱含量的测定【Ｊ】．药 学学，２００２，１８（２）：１ １３—１１５ ［５］贤景春，陈美赢．超声提取龙眼核总黄酮量的工艺ｆＪ１．食品研究 与开发，２０１０，３１（４）：５—７ ［６］司徒琳莉，李洪波，郑险峰，等．生物碱的作用及其生产［Ｊ】．牡丹江 师范学院，２００３（１）：７—８ 收稿日期：２０１２—０６—２９
