微藻提脂
甲醇(CH30H)氯仿(CHCl3)溶液：甲醇-氯仿(2：1/V：V)
溶液的配制：l％氯化钠溶液：称取1g氯化钠溶解到蒸馏水定容至100ml；
操作步骤：
1.冷冻干燥获得干藻粉，放入粉碎机中粉碎待用。采用液氮研磨法，准确称取粉碎的干藻粉0.2g (m)，放入研钵中，加入液氮反复研磨。
2.用7.0ml甲醇-氯仿(2：1，V：V) 提取，超声5min混匀，离心分离15min后，残渣再加1.5ml甲醇-氯仿(2：1，V：V)， 离心分离，保留有机相；残渣再加1．5ml甲醇．氯仿(2：l，V：V)，离心分离，保留有机相，一共重复2次。
3.合并有机相提取液转移到分液漏斗中，加入2．5ml氯仿和 3．0 ml 1％氯化钠溶液，混匀，静置分层，回收下层。加2.5ml氯仿于原上、中层溶液中再萃取一次，合并下层液；再加2．5ml氯仿于原上、中层溶液中再萃取一次。
4.合并下层液，置于提脂瓶中(m1)，50°C氮气挥干溶剂至恒重，于天平称量得到微藻总脂和提脂瓶的总重量(m2)
W=(m2-m1)/m *100%
W……………脂类质量分数，％；
m……………试样质量，g；
ml…………一提脂瓶质量，g；
m2…一……一提脂瓶与样品所含总脂质量，g。
脂肪酸测定
所需试剂（色谱级）：a：正己烷(C6H14)；b．氯仿(CHCl3)；c．甲醇(CH30H)。
所需药品：（分析级）：a．无水硫酸钠：400℃烘烧4 h，冷却后置于干燥器中，待用；
b．氢氧化钾(KOH)；c．浓盐酸(HCl)；d．氯化钠(NaCl)。
所需标准品：a．十九碳酸（内标）；b. 脂肪酸混标（外标）
溶液的配制：
a．0.04mol／L氢氧化钾甲醇溶液的配制：将2．24g氢氧化钾溶解到100mL甲醇
b．盐酸-甲醇(V：V=l：9)溶液的配制,100mL
c．内标溶液的配制：称取15.0 mg十九碳酸于10 ml容量瓶中，用正己烷稀释至刻度；
d．氯化钠饱和溶液的配制：将过量氯化钠溶解到蒸馏水中配制成饱和溶液
操作步骤：
1.将提取的总脂置于10ml具塞试管中，加入氢氧化钾-甲醇溶液5.0 ml，再加20 ul浓度为1.5 mg／ml的十九碳酸内标，混匀，充氮气保护。
2.置于60℃水浴环境下皂化60 min，皂化过程中每隔10min振荡一次；将皂化好的样品取出冷却后加入盐酸-甲醇(1：9)溶液4．0 ml，混匀，充氮气保护。
3.再60℃水浴甲酯化20 min，甲酯化过程中每隔10min振荡一次；将甲酯化好的样品冷却后加入饱和食盐水3．0 ml，加入正己烷1．0 ml，充分振荡，静置，取正己烷层用无水硫酸钠脱水后进行色谱分析。
色谱分析条件：
载气：高纯氮气(99．999％)，lml／min；
检测器温度：280℃；
进样口温度：270℃
进样量：1uL；
进样方式：无分流进样；
流速：1 ml／min(恒流模式)；
升温程序：初温50℃，10℃／min升到280℃。
