第八章
一、填空题1.微生物遗传变异和育种
Griffith是第一个发现转化现象的。并将引起转化的遗传物质称为转化因子。2.Avery和他的合作者分别用降解DNA、RNA和蛋白质的酶作用于有毒的S型细胞抽提物，然后分别与无毒的R型细胞混合，结果发现，只有DNA被酶解而遭到破坏的抽提物无转化活性，说明DNA是转化所必须的转化因子。3.AlfredD.Hershey和MarthaChase用P32标记T2噬菌体的DNA，用S35标记的蛋白质外壳所进行的感染实验证实：DNA携带有T2的全部遗传信息。4.H.FraenkelConrat用含RNA的烟草花叶病毒进行的拆分与重建，实验证明RNA也是遗传物质。5.细菌在一般情况下是一套基因，即单倍体；真核微生物通常有两套基因又称二倍体。6.大肠杆菌基因组为双链环状的DNA分子，在细胞中以紧密缠绕的较致密的不规则小体形式存在于细胞中，该小体被称为拟核。7.大肠杆菌基因组的主要特点是：遗传信息的连续性，功能相关的结构基因组成操纵子结构，结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝，基因组的重复序列少而短。8.酵母菌基因组的最显著的特点是高度重复，酵母基因组全序列测定完成后，在其基因组上还发现了许多较高同源性的DNA重复序列，并称之为遗传丰余。9.质粒通常以共价闭合环状的超螺旋双链DNA分子存在于细胞内，但从细胞中分离的质粒大多是3种构型，即CCC型、OC型和L型。某些特殊病毒。10.原核生物中的转座因子有三种类型：插入顺序、转座子和11.营养缺陷型式微生物遗传学研究中重要的选择标记和育种的重要手段，由于这类突变型在选择培养基上不生长，所以是一种负选择标记，需采用影印平板的方法进行分离。12.在普遍性转导中，噬菌体可以转导给体染色体的任何部分导手提细胞中；而在局限性转导中，噬菌体总是携带同样的片段到受体细胞中。13.根据感受态建立方式，可以分为自然遗传转化和人工转化，前者感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性；后者则是通过认为诱导的方法，使细胞具有摄取DNA的能力，或人为地将DNA导入细胞内。14.丝状真菌遗传学研究主要使借助有性过程和准性生殖过程，并通过遗传分析进行的，而准性生殖是丝状真菌，特别是不产生有性孢子的丝状真菌特有的遗传现象。15.为了提高诱变效率，常用物理、化学两种诱变剂交替使用，待诱变的菌株或孢子悬液一定要混匀，使其能均匀接触诱变剂。16.原生质体融合技术主要包括原生质体的制备、原生质体的融合、原生质体的再生和融合子选择等步骤。二、选择题1.基因组通常指全部一套基因。由于现在发现许多序列非编码序列具有重要的功能，因此，目前基因组的含义实际上包括编码蛋白质的结构基因、以及目前功能还尚不清楚的（B）。A.RNA序列2.B.DNA序列C.序列D.操纵子序列最小的遗传单位是（B）。B.基因C.密码子D.核苷酸A.染色体3.大肠杆菌及其他原核微生物的遗传物质是以（D）形式在细胞中执行着诸如复制、重组、转录、翻译以及复杂的调节过程。A.环状4.B.核酸C.真核D.拟核琼脂糖凝胶电泳是根据（B）和电泳呈现的带型将染色体DNA与质粒分开。B.相对分子质量大小C.凝胶用量D.线形结构A.数量5.插入序列和转座子有两个重要的共同特征；他们都携带有编码转座酶的基因，该酶是转座所必须的；另一个共同特征是他们的两端都有（A）。A.反向末端重复序列6.B.不同源序列C.同源序列D.不重复序列Mu噬菌体是一种以大肠杆菌为宿主的温和噬菌体，其基因组上除含有为噬菌体生长繁殖所必须的基因外，还有为转座所必需的基因，因此它也是最大的（D）。A.噬菌体B.插入序列C.转座子D.转座因子7.形成转导颗粒的噬菌体可以是温和的也可以是烈性的，主要的要求是具有能偶尔识别宿主DNA的（B），并在宿主基因组完全降解以前进行包装。A.裂解机制8.B.包装机制C.识别机制D.侵入机制诱变育种是利用各种诱变剂处理微生物细胞，提高基因的随机（C），通过一定的筛选方法获得所需要的高产优质菌株。A.重组频率9.B.融合频率C.突变频率D.频率某个碱基的改变，使代表某种氨基酸的密码子变为蛋白质合成的终止密码子（UAA,UAG,UGA）。蛋白质合成提前终止，产生短的蛋白质，这种基因突变是（C）。A.同义突变B.错义突变C.无义突变D.移码突变10.细胞在DNA修复过程中会出现差错，细菌细胞具有校正和修复功能，除了DNA聚合酶的纠错功能外，还有比较复杂的（D）。A.光保护作用三、问答题1.试述用艾姆氏（Ames）法检测致癌剂的理论依据、一般方法及其优点。鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株在基本培养基的平板上不能生长，如发生回复突变成原养型后能生长。方法大致是在含待测可疑“三致”物（例如黄曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯、“反应停”或二垩英等）的试样中，加入鼠肝匀浆液，经一段时间保温后，吸入滤纸片中，然后将滤纸片放置于平板。经过培养后，出现三种情况：①在平板上无大量菌落产生，说明试样中不含诱变剂；②在纸片周围有一抑制圈，其外周围出现大量菌落，说明试样中有某种高浓度诱变剂存在；③在纸片周围长有大量菌落，说明试样中有浓度适当的诱变剂存在。优点：快速、准确和费用省等。1.诱变育种的基本环节有哪些？整个工作的关键是什么？工作关键：①选择简便有效的诱变剂②挑选优良的出发菌株③处理单孢子悬液④选用最适诱变剂量⑤充分利用复合处理的协同效应⑥利用和创造形态，生理和产量相关指标⑦设计和采用高效的筛选方案方法。⑧创造新型筛选方法。2.在检出缺陷型过程中采用的夹层培养法，为什么基本培养基要倒成“三明治”状？夹层培养法是先在培养皿上倒一层基本培养基，冷凝后再加上一层含菌液的培养基，凝固后再浇上基本培养基，经培养后，在皿底对首先出现的菌落做标记，再倒上一薄层完全培养基，第三层是为了防止菌体蔓延，营养物质渗透，再培养，这时出现的新菌落，多数即为营养缺陷性。B.系统C.突变作用D.修复系统4.为什么在进行诱变处理时，要把成团的微生物细胞或孢子制成充分分散的单细胞或孢子悬液？一方面分散状态的细胞，可以均匀的接触诱变剂，另一方面又可避免长出不纯菌落。在某些微生物中，由于许多微生物细胞内同时含有几个核，即使用单细胞悬浮液还是易长出不纯菌；有时虽处理了单核的细胞或孢子，由于诱变剂只作用DNA双链中某的一条单链，故某一突变还是无法反映在当代的表型上。只有经过DNA复制、细胞后，这一变异才在表型上表述，出现不纯菌落。不纯菌落的存在，是诱变育种中初分离的菌株经传代后很快出现生产性状“衰退”的主要原因。故对霉菌、放线菌应处理分生孢子，芽孢杆菌则应处理芽孢。5.请设计实验决定在一种特定的细菌中发生的遗传转移过程是转化、转导还是接合？说明每一种的预期结果。(1)将两种不同的二重或三重营养缺陷型菌株混合培养，在基本培养基上长出的菌落为重组菌株(发生了遗传交换)(2)如果在混合培养期间加入DNase，在基本培养基上无重组菌落出现，这说明上述重组是因细胞间的接触转化所致；如果仍有重组菌落产生，说明可能是由于接合和转导所致。(3)利用只能持留细菌的滤板相隔的u型管进行实验，如果在基本培养基上不产生重组菌落，则判断为接合作用；如果产生重组菌落，则又有两种可能，即转化或转导。(4)利用能持留细菌和细菌病毒而不能持留DNA的滤板相隔的u型管实验，如果不产生重组菌落则为转导，如果仍产生重组菌落则为转化。
