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PBS缓冲液配制方法

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PBS缓冲液配制

0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法

NaCl 8.0g ; KCl 0.2g ; Na2HPO4 1.44g ; KH2PO4 0.24g ;加蒸馏水 至 1000ml,调节pH 到 7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节) 。

用于免疫反应时可加入 0.1%叠氮钠(0.1g/100ml PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。

PBS缓冲液配方

PH 7.6 7.4 7.2 7.0 H2O 1000 1000 1000 1000 NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5 Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2 NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4

根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。

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