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移液的使用

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在进行分析测试方面的研究时,一般采用移液(pipette)量取少量或微量的液体。对于移液的正确使用方法及其一些细节操作,是很多人都会忽略的。现在分几个方面详细叙述。

1、量程的调节

正确的容量设定分为两个步骤,一是粗调,即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;二是细调,当容量值接近自己的预想值以后,应将移液器横置,水平放至自己的眼前,通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响。

在容量设定时,还有一个需要特别注意的地方。当我们从大值调整到小值时,刚好就行;但从小值调整到大值时,就需要调超三分之一圈后再返回,这是因为计数器里面有一定的空隙,需要弥补。

在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液。

2、头(吸液嘴)的装配

在将头(pipette tips)套上移液时,很多人会使劲地在头盒子上敲几下,这时错误的做法,因为这样会导致移液的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液(器)垂直插入头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道(如8道或12道)移液,则可以将移液的第一道对准第一个头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。

3、移液的方法

1).预洗吸头:

在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。其次,在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时就需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。

2)吸液:

先将移液器排放按钮按至第一停点,再将吸头垂直浸入液面,浸入的深度为:P2、P10小于或等于1毫米,P20、P100、P200小于或等于2毫米,P1000小于或等于3毫米,P5ML、P10ML小于或等于4毫米(浸入过深的话,液压会对吸液的精确度产生一定的影响,当然,具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握),平稳松开按钮,切记不能过快。

移液之前,要保证移液器、头和液体处于相同温度。吸取液体时,移液器保持竖直状态,

这时可以采取两种移液方法。

一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松

开按钮。

二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的头,弃之。

3)放液:

放液时,吸头紧贴容器壁,先将排放按钮按至第一停点,略作停顿以后,再按至第二停点,这样做可以确保吸头内无残留液体。如果这样操作还有残留液体存在的话,您就应该考虑更换吸头了。

4)卸掉吸头:

卸掉的吸头一定不能和新吸头混放,以免产生交叉污染。

4、移液器的正确放置

使用完毕,可以将其竖直挂在移液架上,但要小心别掉下来。当移液器头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。

5、维护保养

1)校准:

校准是可以在20-25度环境中,通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行。

两分钟检查法:

这是可以对手中移液器进行快速检查的一种简单方法,通过检查,来判断我们手中的移液器是否处于一种正常的工作状态。

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