高密度脂蛋白测定

实验25 高密度脂蛋白测定

【实验目的】 （1）、掌握高密度脂蛋白测定的基本原理。 （2）、熟悉722S分光光度计使用。 【实验原理】

空腹血浆脂蛋白主要为低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL），PTA-Mg2+具有选择性沉淀载脂蛋白为apoB的脂蛋白LDL，则上清液为HDL，HDL以HDL-C表示含量。 胆固醇酯酶

胆固醇酯+H2O————→胆固醇+RCOOH 胆固醇氧化酶

胆固醇+O2————→△4-胆甾烯酮+H2O2 过氧化氢酶

H2O2+4-AA+ESPAS————→醌亚胺染料+H2O 【实验步骤】

1、 取三只试管，分别标号为空白管B、标准管S和测定管T 2、 按照下表向试管中加入试剂并处理试管内的液体

空白管B 标准管S 测定管T

200 蒸馏水/μl — —

200 血清/μl — —

200 标准液/μl — —

200 200 200 沉淀剂/μl

混匀，置于室温保温10min，再以3000r/min离心15min，吸取上清液

150 150 150 上清液/μl

1500 1500 1500 工作液/μl

3、 试剂添加完毕后，混匀，置于37℃保温10min。

4、 以空白管调零，在546nm波长下比色读取各管A值。 【实验结果】HDL-C含量（mmol/L）=AT/AS*(标准液浓度）=L 【实验讨论】

高密度脂蛋白为血清蛋白之一。缩写为HDL。亦称为a1脂蛋白。比较富含磷脂质，在血清中的含量约为300mg/dl。其蛋白质部分， A－Ⅰ约为75%， A－Ⅱ约为20%。由于可输出胆固醇促进胆固醇的代谢，所以现在作为动脉硬化预防因子而受到重视。高密度脂蛋白运载周围组织中的胆固醇，再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出，动脉造影证明高密度脂蛋白胆固醇含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。所以高密度脂蛋白是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子。俗称“血管清道夫”。

(注意事项)

（1）沉淀后上清液必须清澈，上清液浑浊时，不得分析测定，应以生理盐水1:1稀释后再重新离心测定，结果乘以2。

（2）实际不使用，应及时加盖，低温避光保存。

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