第５期 吴李川，等：氧化亚铁硫杆菌及其应用研究进展 ・５３・ 氧化亚铁硫杆菌及其应用研究进展 吴李川，陈 茂，邓佳禹，谢鸿观 （成都理工大学材料与化学化工学院，四川成都 ６１００５９） 摘要：氧化亚铁硫杆菌（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｕｓ，Ｔ．ｆ）是好氧嗜酸中性菌，广泛应用于很多领域，但由于Ｔ．ｆ菌特殊的生物学特性，导致菌 种的分离保藏等方面还存在一些瓶颈。本文概述了Ｔ．ｆ菌的分离纯化、复壮及保藏等方面的研究进展，并且阐述了Ｔ．ｆ菌在冶金和环境 工程中的应用。 关键词：氧化亚铁硫杆菌（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｕｓ）；培养；冶金；环境工程 中图分类号：Ｘ１７２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８—０２１Ｘ（２０１７）０５—００５３—０２ 氧化亚铁硫杆菌（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｕｓ）简称Ｔ．ｆ菌，属 菌（酵母Ｒ３０）菌液，再倒人分离硫杆菌的固体培养基作上层平 微生物中原核生物界、化能营养原核生物门、细菌纲、硫化细菌 板，涂布一定稀释度的含硫杆菌的菌悬液，３０℃下倒置培养。 科、硫杆菌属…，是由Ｔｅｍｐｌｅ和Ｃｏｌｍｅｒ发现并命名的 。Ｔ．ｆ 结果显示Ｔ．ｆ菌菌落在双层平板上检出率提高２．１倍。Ａｈｍａｄ 菌靠氧化基质中的Ｆｅ 为Ｆｅ“和低价态硫为硫酸根而获取能 Ｍ＿８ 曾用一种名为“Ｇｅｌｒｉｔｅ”的细菌多糖来代替琼脂培养氧化亚 量 ｊ，于广泛生存在土壤、淡水、海水、垃圾、海底污泥、硫化矿 铁硫杆菌，发现细菌克隆率高达９２％；还有研究者将表面活性 水、硫磺泉和沉积硫内，尤以产硫化物的环境经常发生。目前 剂加入到培养基中来改变氧化亚铁硫杆菌的培养特征，也取得 Ｔ．ｆ菌成为工业微生物浸出各种金属的主要菌种之一，而在环 了一定的分离效果。 境保护方面及一些科研领域的研究也越来越受到广泛的重视。 ３氧化亚铁硫杆菌的复壮 ｌ 氧化亚铁硫杆菌的生物学特征 所谓菌种复壮，即生活力已下降，要使其恢复。菌种退化 氧化亚铁硫杆菌（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｕｓ）通常以单个、两 是不可避免的，如果生产菌种已经退化，那么我们要及时对已 个或者几个呈链状分布，在显微镜下观察，单个细菌呈短杆状， 退化的菌种进行复壮，使优良性状得以恢复。一支优良菌种， 长１．０至数微米，宽０．５ｌｘｍ，两端钝圆，有鞭毛，能活泼运动 Ｊ。 如果任其变异，常导致衰退。如果从无数个变异的菌株中，不 其生长的最佳ｐＨ值为２～３．５，最佳环境温度为２８～３４￣Ｃ。由 断挑选比原来更为优良的菌落，不仅能防止菌种的退化，还能 于是好氧的化能自养型细菌，氧化亚铁硫杆菌对０：和ＣＯ：也 达到复壮和提高的效果。 有一定的要求，分别要求为１．０ ｇ（Ｏ２）／ｇ（黄铁矿）和０．０１９ ｇ 生产上应用的菌种，在使用和保藏过程中，因外界条件和 （ＣＯ：）／ｇ（黄铁矿）”ｊ。在９Ｋ固体培养基上呈红棕色菌落，而 菌种内在因素的矛盾引起菌体的变异，可能发展到菌种的退 在硫代硫酸盐培养基上呈黄色，外周白色的菌落。这说明 化，发生某些形态和生理性能方面变化。如在斜面上发现黑曲 氧化亚铁硫杆菌细胞的形状及菌落颜色、大小与营养条件有 霉抱子越传代越少和菌种残缺不齐等现象；酵母则发生细胞变 关，即在不同的营养条件下具有不同的形态特征。由于该菌的 形，生长缓慢，或生产性能降低等。菌种的这种退化是由量变 特殊生理特性，使其在浸矿、有用金属的回收、矿物材料的微生 到质变的过程，当个体变异的数盘达到一定程度时，菌种才能 物加工、脱除Ｈ：ｓ和ＳＯ：等气体及酸性废水的处理等领域具有 表现出退化现象。实践证明，传代次数越多，越易退化，因此在 潜在的应用价值。 保藏菌种时，尽量采取一些能够较长时间保藏的方法，避免经 ２氧化亚铁硫杆菌的分离纯化 常转接，在退化现象出现以后，要加以复壮，以恢复正常的生产 与大多数细菌～样，氧化亚铁硫杆菌的分离纯化使用的是 性能。 一种常用的手段——固体培养分离。但Ｔ．ｆ菌要求培养温度 ４氧化亚铁硫杆菌的保藏 高，通氧性好并且生长缓慢，培养基容易干燥。所以Ｔ．ｆ菌的固 在生产和研究工作中，为了避免菌种死亡和污染杂菌，所 体培养相当困难，形成菌落要１～３周的时间。同时常用的琼 以必须妥善地保藏好菌种。菌种保藏的基本原理是抑制菌种 脂等有机凝固剂在Ｔ．ｆ菌适宜生长的酸性环境下会水解产生对 的代谢活动，使菌种处于休眠状态、停止繁殖，以减少菌种的变 其生长有强烈抑制作用的有机物，使得形成的菌落是万分之 异。在Ｔ．ｆ菌的保藏过程中，不管采用什么方法，都会造成细菌 一 ，因此寻找理想的凝固剂成为氧化亚铁硫杆菌分离纯化工 数目减少，同时伴随细菌亚铁氧化活性降低，因此，添加了保护 作中急待解决的问题之一。张在海、邱冠周等人 调整培养基 剂的菌种冷冻后，其存活率一般都有较大提高。二甲亚砜 成分，当硫酸亚铁为２２．２ ｇ／Ｌ，磷酸氢二钾为０．５ ｇ／Ｌ，ｐＨ值为 （ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ，ＤＭＳＯ）和甘油是冷冻保藏菌株最常用的保 ３．０再加入一定浓度的硫氰酸钾，并采用间歇培养方法时，氧化 护剂。Ａ．Ｐ．Ｈａｒｒｉｓｏｎ等 认为甘油含量为２％～５５％时对细菌 亚铁硫杆菌有最好的菌落分离效果。控制好这些条件，菌落总 都有保藏效果，具体浓度随细菌种类不同而不同，一般选用 数可以比９Ｋ固体培养基提高数百倍，甚至更高。王世梅＂ 等 １０％。杨宇” 等人通过正交试验，冷冻保藏Ａ．ｆ菌的保护剂的 采用双层平板法，即用２％的水琼脂作底层平板，上面涂布异养 最优化组合１００ ｇ／Ｌ甘油＋１００ ｇ／Ｌ海藻糖＋１８０ ｇ／Ｌ蔗糖＋５Ｏ 收稿日期：２０１７—０１—２０ 基金项目：四川省重点研发项目（２０１７ＧＺ０３８７，２０１７ＧＺ０２９３） 作者简介：吴李川（１９９２一），男，Ｉ￣ｔ，ｌｌｌ宜宾人，硕士研究生，主要从事应用微生物学研究； 通讯作者：谢鸿观（１９７８一），男，安徽 巢湖人，副教授，博士，主要从事资源环境微生物应用研究。 ・５４・ 山东化工 ＳＨＡＮＤ０ＮＧ ＣＨＥＭＩＣＡＬ ＩＮＤＵＳＴＲＹ ２０１７年第４６卷 Ｌ二甲亚砜，该组合能使Ａ．ｆ菌冷冻的存活率达到８９％。张 燕飞 等人通过对甘油、海藻糖、蔗糖和牛血清蛋白组成的冷 冻干燥保护剂的研究，对存活率影响的主次顺序依次为：甘油 ＞海藻糖＞牛血清蛋白＞蔗糖，其保护剂的最优化组合为甘油 ５％、海藻糖１５％、蔗糖１８％、牛血清蛋白１０％，该组合的保护 化石能源结构中，目前煤炭仍占重要地位，是世界上最重要的 能源之一。煤炭中的硫主要是以黄铁矿和有机硫的形态存在。 对于细粒黄铁矿和有机硫，现有的物理选煤方法无法进行有效 脱除，用化学方法虽能除去９０％以上的硫，但反应条件、处理成 本很高。用Ｔ．ｆ菌可有效地去除黄铁矿中的硫，并且反应条件 温和、成本低。 Ｔ．ｆ菌具有氧化能力，能氧化Ｆｅ ，又能氧化元素硫、Ｈ，、 剂可使冷冻干燥Ａ．ｆ菌的存活率达到９４％。 ５ 氧化亚铁硫杆菌在硫化矿中的应用 许多微生物可以通过多种途径对矿物作用，将矿物中的有 Ｈ：ｓ以及其他无机成分获得能量。铁离子存在的系统中，氧化 价元素转化为溶液中的离子。在欧洲，有记载的最早的生物冶 金是１６７０年在西班牙的Ｒｉｏ Ｔｉｎｔｏ矿，人们从矿坑水中回收细 菌浸出的铜 ，而我国是世界上最早采用生物冶金技术的国 家，早在公元前２世纪，就有记载了用铁从硫酸铜溶液中置换 铜的化学作用，堆浸在当时就是生产铜的普遍做法 。 在金属硫化物矿山环境中，氧化亚铁硫杆菌对硫化物的氧 化分解具有重要作用。目前知道有多种黄铁矿氧化菌，它们可 在有氧的情况下，通过氧化元素硫、黄铁矿、铁离子等来获得能 量，并通过固定碳或其它有机营养物而生长，其中氧化亚铁硫 杆菌仍被认为是酸性环境中浸矿的主导菌种 。Ｓａｌｄｉ等 人 通过对黄铁矿进行接菌与未接菌对比研究发现，接菌的黄 铁矿样品的氧化速率是未接菌的９～３９倍。Ｓａｓａｋｉ等人 的 研究结果同样表明氧化亚铁硫杆菌能显著地加速黄铁矿的氧 化速率。刘云国－＂ 等研究单一菌种以及混合菌种对尾矿样本 进行淋滤处理，结果表明，在采用适当菌种的前提下，尾矿中重 金属的溶解率都得到了不同程度的提高。 ６在电子废弃物中的应用 随着电子科技的高速发展，各类电子产品（电脑、电视、手 机等）的普及率日益提高，并且它们每年以惊人的速度更新换 代。然而电子废弃物会带来极大的危害。若能对其合理的利 用可以节约大量的能源和资源，具有显著的经济和环境效益。 氧化亚铁硫杆菌浸提电子废弃物中金属有两种作用方式， 分别为间接作用和直接作用。在间接作用中，氧化亚铁硫杆菌 不断地把溶液中的Ｆｅ“氧化成Ｆｅ ，Ｆｅ”再进一步发生反应使 金属溶出，氧化亚铁硫杆菌不直接与目标金属作用。直接作用 是指氧化亚铁硫杆菌首先通过静电作用吸附到粉碎的废弃电 子物表面，然后再进一步与其中的金属作用使其溶出” 。 ７ 氧化亚铁硫杆菌在环境工程中的应用 ７．１ 在工业废气中脱硫应用 在工业废气中，Ｈ，Ｓ是一种有毒、有害气体。目前，Ｔ．ｆ菌 在化工、石油、钢铁工业中去除Ｈ：Ｓ的研究正在被人们所关注。 传统的烟气脱硫方法存在吸收剂无法循环利用、处理成本高等 问题。近年来，随着环境保护学科的发展和相关学科的相互交 叉，在烟气脱硫技术中生物脱硫是一种比较新的烟气脱硫 （ＦＧＤ）技术思路。 氧化亚铁硫杆菌脱硫的原理是首先将烟气中的含硫化合 物转移到液相中，再利用氧化亚铁硫杆菌自身氧化还原的代谢 过程，实现液相中含硫化合物价态的转化，以单质硫或硫酸盐 的形式将硫进行回收再利用 。目前，微生物脱硫的原理主要 包括以下两大类 ：一是利用微生物的氧化作用和过渡金属离 子催化氧化，将烟气中的Ｈ Ｓ转化为单质Ｓ；二是利用硫酸盐还 原菌和硫氧化菌之间的协同作用，将烟气ＳＯ 转化为单质硫。 ７．２在煤炭中脱硫应用 世界的主要能源在相当长时间内仍以化石燃料为主。在 亚铁硫杆菌氧化Ｓ０：的过程分为两个方面：一方面，在化学反 应器内利用Ｆｅ“的氧化还原作用，ｓ０ 被Ｆｅ 氧化生成单质 ＳＯ，，同时Ｆｅ“又被还原成Ｆｅ“，在生物反应器内氧化亚铁硫杆 菌又将Ｆｅ 氧化成Ｆｅ 从而循环利用 ；另一方面，氧化亚铁 硫杆菌也可以直接将ｓＯ 氧化成为ｓ０ ，因此整个脱硫过程是 氧化亚铁硫杆菌直接氧化和间接氧化作用共同作用的结果 ］。 ８ 结语 氧化亚铁硫杆菌在工业和环境工程中的应用具有十分诱 人的前景，但目前对氧化亚铁硫杆菌的应用研究大多处于实验 室阶段或者是半工业水平。其中有两个原因：一是在驯化原始 菌时用酸量较多，容易造成钢铁和混凝管道腐蚀导致管道堵 塞，二是Ｔ．ｆ菌的生长周期长，并且没有实现规模化的培养。另 外，随着原生质融合技术和现在基因技术的快速发展，Ｔ．ｆ菌在 煤炭生物脱硫和污泥的重金属脱硫等领域也将得到广泛的应 用，这些技术都需要进一步研究和发展。因此，接下来我们研 究的方向是在不同的应用领域培养驯化适应不同环境的特效 菌种，并采用有效的方法改良菌种，以获得繁殖速度快和适应 性强的菌种，使Ｔ．ｆ菌能在各个领域广泛的应用，从而更好地利 用它造福人类。 参考文献 ［１］邓恩建，杨朝晖，曾光明，等．氧化亚铁硫杆菌的研究概况 ［Ｊ］．黄金科学技术，２００５，１３（５）：８—１２． ［２］Ｔｅｍｐｌｅ Ｋ Ｌ，Ｃｏｌｍｅｒ Ａ Ｒ．Ｔｈｅ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｒｏｎ ｂｙ ａ ｎｅｗ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ：Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｎｓ［Ｊ］．Ｊ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ，１９５１， ６２：６０５—６１１． ［３］汪来发，杨宝君，李传道．根结线虫生物防治研究进展［Ｊ］． 南京林业大学学报，２００２，２６（１）：６４—６８． ［４］布坎南Ｒ Ｅ，吉本期Ｎ Ｅ．伯杰细菌鉴定手册［Ｍ］．８版．北 京：科学出版社，１９８４． ［５］Ｔｕｏｒｉｎｅｍ Ｏ Ｈ，Ｋｅｌｌｙ Ｄ Ｐ．Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｎｓ（Ｉ）．Ｕｓｅ ｏｆ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｉｆｌｔｅｒ ａｎｄ ｆｅｒｒｏｕｓ ｉｒｏｎ ａｇａｒ ｔｏ ｄｅｔｅｍｉｎｅ ｖｉａｂｌｅ ｎｕｍｂｅｒｓ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｗｉｔｈ １４ＣＯ２一ｆｉｘａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｒｏｎ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ａｓ ｍｅａｓｕｒｅｓ ｏｆ ｒｇｏｔｗｈ［Ｊ］．Ａｒｃｈ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ， １９７３，８８：２８５～２９８． ［６］张在海，邱冠周．氧化亚铁硫杆菌的菌落分离研究［Ｊ］．矿产 综合利用，２００１（１）：１９—２３． ［７］Ｖｉｓｃａ Ｐ，Ｂｉａｎｅｈｉ Ｅ，Ｐｏｌｉｄｏｒｏ Ｍ．Ａ ｎｅｗ ｓｏｌｉｄ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｉｓｌｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｎｕｍｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｉｏｂａｃｉｌｔｕｓ ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｎｓ［Ｊ］．Ｊ Ｇｅｎ Ａｐｐｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，１９８９，３５：７１—８１． ［８］Ｋｈａｌｉｄ Ａ Ｍ，Ｂａｔｔｉ Ｔ．Ａｎｉｍｐｒｏｖｅｄ ｓｏｌｉｄ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ， ｅｎｕｍｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓ ｏｆ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃ ｉｒｏｎ ａｎｄ ｓｕｌｐｈｕｒ ｏｘｉｄｉｚｉｎｇ ｂａｃｔｅｉｒａ［Ｊ］．Ａｐｐｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｂｉｏｔｅｅｈｎｏｌｏｇｙ， １９９３，３９：２５９—２６３． （下转第５８页） 山・东化工 ５８・ ＳＨＡＮＤＯＮＧ ＣＨＥＭＩＣＡＬ ＩＮＤＵＳＴＲＹ ２０１７年第４６卷 ［１９］Ｈａｎｓｅｎ Ｊ Ｓ，Ｌａｒｓｅｎ Ｓ Ｔ，Ｐｏｕｌｓｅｎ Ｌ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ａｄｊｕｖａｎｔ ｅｆｅｃｔｓ ｏｆ ｉｎｈａｌｅｄ ｍｏｎｏ——２－．ｅｔｈｙｌｈｅｘｙｌ ｐｈｔｈａｌａｔｅ ｉｎ ＢＡＬＢ／ｃＪ ｍｉｃｅ ［２９］高庚申，李村雄，张明时，等．超声萃取一毛细血管气相色 谱法测定塑料制品中四种酞酸酯［Ｊ］．贵州师范大学学报 （自然科学版），２００８，２６（２）：１０５—１０８． ［３０］柴丽月．食品级包装材料中邻苯二甲酸酯类的检测与迁移 ［Ｊ］．Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２００７，２３２（１—２）：７９—８８． ［２Ｏ］裴秀从，郭丽，张玉敏，等．活化Ｔ细胞核因子在ＤＥＨＰ ＩＬ一４表达中作用［Ｊ］．中国公共卫生，２０１２，２８（１１）： １４４９—１４５２． 规律的初步研究［Ｄ］．南京：南京农业大学，２００８． ［３１］国家质量监督检验检疫总局．ＧＢ／Ｔ ２１９１１—２００８食品中邻 ［２１］Ｎｉｓｈｉｏｋａ Ｊ，１ｗａｈａｒａ Ｃ，Ｋａｗａｓａｋｉ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｄｉ一（２一 ｅｔｈｙｌｈｅｘｙ１）ｐｈｔｈａｌａｔｅ ｉｎｄｕｃｅｓ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ 苯二甲酸酯的测定［ｓ］．北京：中国标准出版社，２００８． ［３２］张前龙，王宇，曹云，等．食品塑料包装中酞酸酯类 环境污染物气相色谱测定方法的研究［Ｊ］．中国卫生检验 杂志，２Ｏｏ９，１９（１２）：２８３３—２８３４． ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ［Ｊ］． Ｉｌａｍｍａｔｆｎｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１２，６１（１）：６９—７８． ［２２］李丽萍，左锋，张宁，等．邻苯二甲酸二（２一乙基已 ［３３］汪—龙，田，林亲录，等．白酒中塑化剂的检测方法 ３８７． 基）酯对雄性成年大鼠脑神经细胞的毒性作用［Ｊ］．宁夏 医科大学学报，２０１１，３３（８）：７１５—７１７． 及控制策略［Ｊ］．食品工业科技，２０１３，３４（１１）：３８４ ［３４］黄丽雪，刘丽霞，董同力嘎，等．高效液相色谱法测定３种 邻苯类增塑剂检测条件的研究［Ｊ］．包装工程，２０１２（１７）： ３９—４３． ［２３］张炽坚，张明明，孙远明，等．邻苯二甲酸二丁酯和二（２ 一乙基已基）酯对大鼠尿液中超氧化物歧化酶酶活力和丙 二醛含量的影响［Ｊ］．南方医科大学学报，２０１２，３２（２）： １６０—１６４． ［３５］徐—忠，陆步诗，李新社，等．白酒塑化剂的气质联用（ＧＣ ＭＳ）检测方法的选择与优化［Ｊ］．邵阳学院学报（自然科 皓，唐莹，司冠儒，等．白酒中塑化剂检测方法的分 ［２４］Ｍｅｅｋｅｒ Ｊ Ｄ，Ｃａｌａｆａｔ Ａ Ｍ，Ｈａｕｓｅｒ Ｒ．Ｄｉ（２一ｅｔｈｙｌｈｅｘｙ１） ｐｈｔｈａｌａｔｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ ｍａｙ ａｌｔｅｒ ｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｍｅｎ 学版），２０１５，１２（１）：６７—７４． ［３６］徐析研究［Ｊ］．酿酒，２０１５，４２（Ｉ）：１１１—１１４． ［３７］Ｅｚｅｒｓｋｉｓ ｚ，Ｍｏｒｋ￣ｎａｓ Ｖ，Ｓｕｍａｎ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｐｏｌｙａｄｉｐａｔｅｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｐｌａｓｔｉｃｉｓｅｒｓ ｉｎ ｐｏｌｙ（ｖｉｎｙｌ ［Ｊ］．Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｈｅａｌｔｈ Ｐｅｒｓｐｅｃｔ，２００７，１１５（７）：１０２９—３４． ［２５］郑和辉，赵立文，刘玉敏，等．饮用水中邻苯二甲酸酯的气 相色谱一质谱测定法［Ｊ］．环境与健康杂志，２００５，２２（５）： ３７７—３７８． ［２６］陆步诗，陈金魁，李新社，等．白酒塑化剂检测方法及风 险控制［Ｊ］．邵阳学院学报（自然科学版），２０１６，１３（１）： ７７—８４． ｃｈｌｏｒｉｄｅ）ｇａｓｋｅｔ ｓｅａｌｓ ａｎｄ ｉｎ ｆａｔｔｙ ｆｏｏｄ ｂｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ—ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｙ［Ｊ］．Ａｎａｌｒ Ｃｈｉｍ Ａｃｔａ， ２００７，６０４（１）：２９—３８． ［２７］马继平，李茉，赵秀华，等．固相萃取一反相高效液相色 谱法测定水肿的邻苯二甲酸酯［Ｊ］．分析实验室，２００９，２８ （３）：６—９． ［３８］刘杰，郁宏燕，鲍立杰，等．液相色谱一串联质谱法测 定饮料中ｌ６种邻苯二甲酸酯［Ｊ］．食品科学，２０１２，３３ （１８）：２１１—２１５． ［２８］贾宁，许恒智，胡亚丽，等．固相萃取一气相色谱法测定 北京市水样中的邻苯二甲酸酯类［Ｊ］．分析实验室，２００５， ２４（１）：１８—２１． （本文文献格式：沈玮。张一帆．白酒中塑化剂的来源、危害及 检测方法的研究进展［Ｊ］．山东化工，２０１７。４６（５）：５５—５８．） Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９２，５８（６）：１８５３． （上接第５４页） ［９］Ｈａｒｒｉｓｏｎ Ａ Ｐ．Ｃａｕｓｅｓ ｏｆ ｄｅａｔｈ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａ ｉｎ ｆｒｏｚｅｎ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ ［Ｊ］．Ａｎｔ Ｌｅｅｕｗｅｎｈｏｅｋ，１９５６，２２：４０７—４１８． ［１０］杨宇，张燕飞，何环，等．嗜酸氧化亚铁硫杆菌冷冻保 藏保护剂的正交法优化［Ｊ］．中南大学学报（自然科学 版），２００６，３７（５）：８９１—８９５． ［１６］Ｓａｓａｋｉ Ｋ，Ｔｓｕｎｅｋａｗａ Ｍ，Ｏｈｔｓｕｋａ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｓｕｌｆｕｒ— ｏｘｉｄｉｚｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｉｏｏｘｉｄａｎｓ ｉｎ ｐｙｒｉｔｅ ｗｅａｔｈｅｒｉｎｇ 『Ｊ］．Ｃｏｌｌｏｉｄｓ ａｎｄ Ｓｕｒｆａｃｅｓ Ａ：Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｅａｌ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ａｓｐｅｃｔｓ，１９９８，１３３（３）：２６９—２７８． ［１７］刘云国，肖 鑫，李—欣．土著微生物对尾矿中重金属的淋 ［１１］张燕飞，何５—７． 环，师舞阳，等．正交法优化嗜酸氧化亚铁硫 滤研究［Ｊ］．湖南大学学报（自然科学版），２０１１，３８（２）：１ ４． 杆菌冷冻干燥保护剂［Ｊ］．现代生物医学进展，２００６，６（５）： ［１２］Ｔａｙｌｏｒ Ｊ Ｈ，Ｗｈｅｌａｎ Ｐ Ｆ．Ｔｈｅ ｌｅａｃｈｉｎｇ ｏｆ ｃｕｐｒｏｕｓ ｐｙｒｉｔｅ ａｎｄ ［１８］李利德，贺文智，李光明，等．微生物浸出印刷线路板中金 属的研究进展［Ｊ］．环境污染与防治，２０１１，３３（７）：８３—８６． ｔｈｅ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｐｐｅｒ ａｔ Ｒｉｏ Ｔｉｎｔｏ［Ｊ］．Ｓｐａｉｎ Ｔｒａｎｓ Ｉｎｓｔ Ｍｉｎ Ｍｅｔｌ，１９４３，５２：３５—７１．ａ ［１９］熊代群，汪群慧，李继武，等．工业烟气微生物脱硫的研究 综述［Ｊ］．山东化工，２０１２，４１（８）：２９—３３． ［１３］Ｍｕｒｒ Ｌ Ｅ．Ｔｈｅｏｒｙ ａｎｄ ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ ｃｏｐｐｅｒ ｓｕｌｐｈｉｄｅ ｌｅａｃｈｉｎｇ ｉｎ ｄｕｍｐｓ ａｎｄ ｉｎ—ｓｉｔｕ［Ｊ］．Ｍｉｎｅ Ｓｃｉ Ｅｎｇ，１９８０，１２（３）：１２１． ［２０］邱广亮．微生物法脱除工业烟气的研究［Ｄ］．天津：天津大 学，２００６． ［１４］Ｂｒｕｎｎｅｒ Ｂ，Ｙｕ Ｊ Ｙ，Ｍｉｅｌｋｅ Ｒ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｉｓｏｔｏｐｅ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｏｆ ｐｙｒｉｔｅ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｌａｇ ａｎｄ ｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｐｈａｓｅｓ ｏｆ Ａｃｉｄｉｈｉｏｂａｅｉｔｌｌｕｓ ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｎｓ ［２１］Ｅｕｎｇ Ｈ Ｃ．Ｒｅｍｏｖａｌ ｏｆ ＳＯ２ ｗｉｔｈ ｏｘｙｇｅｎ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ Ｆｅ （ＨＩ）［Ｊ］．Ｍｅｔｌａｌｕｒｇｉｃａｌ Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ Ｂ，１９８６，１７：７４５—７５３． ［２２］Ｔｒｉｂｕｔｓｅｈ Ｈ．Ｄｉｒｅｃｔ ｖｅｓｕｓｒ ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｂｉｏｌｅａｃｈｉｎｇ［Ｊ］． Ｈｙｄｒｏｍｅｔａｌｌｕｒｇｙ，２００１，５９：１７７—１８５． ｒｅｖｅａｌ ａ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｓｔｒａｔｅｇｙ［Ｊ］．Ｅａｃｈ ａｎｄ Ｐｌａｎｅｔａｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｅｔｔｅｒｓ，２００８，２７０（１—２）：６３—７２． ［１５］Ｂａｌｄｉ Ｆ，Ｃｌａｒｋ Ｔ，ＰｏＨａｃｋ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｌｅａｃｈｉｎｇ ｏｆｐｙｒｉｔｅｓ ｏｆｖａｒｉｏｕｓ ｒｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｂｙ Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｏｏｘｉｒｄａｎｓ［Ｊ］．Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ （本文文献格式：吴李川，陈茂，邓佳禹。等．氧化亚铁硫杆菌 及其应用研究进展［Ｊ］．山东化工，２０１７。４６（５）：５３—５４，５８．）
